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細(xì)胞復(fù)蘇原則及操作流程
日期：2025-01-08 01:20
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摘要：
細(xì)胞復(fù)蘇的原則：
在實(shí)際操作中，凍存細(xì)胞要進(jìn)行復(fù)蘇，再培養(yǎng)傳代。復(fù)蘇細(xì)胞一般采用快速融化法。以保證細(xì)胞外結(jié)晶快速融化，以避免慢速融化水分滲入細(xì)胞內(nèi)，再次形成胞內(nèi)結(jié)晶損傷細(xì)胞。
操作流程：
1. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行常規(guī)消du，紫外照射40min以上。
2. 培養(yǎng)液（DMEM）、0.25％胰蛋白酶（Trypsin）恒溫水浴箱370C預(yù)熱20min，備用。
3. 二甲基亞砜（DMSO）在40C冰箱中冷藏30min，備用。
4. 從液氮保存罐中取出凍存管，立即放入400C水浴中，快速搖晃，直至凍存液*融化。...
細(xì)胞復(fù)蘇的原則：
在實(shí)際操作中，凍存細(xì)胞要進(jìn)行復(fù)蘇，再培養(yǎng)傳代。復(fù)蘇細(xì)胞一般采用快速融化法。以保證細(xì)胞外結(jié)晶快速融化，以避免慢速融化水分滲入細(xì)胞內(nèi)，再次形成胞內(nèi)結(jié)晶損傷細(xì)胞。
操作流程：
1. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行常規(guī)消du，紫外照射40min以上。
2. 培養(yǎng)液（DMEM）、0.25％胰蛋白酶（Trypsin）恒溫水浴箱370C預(yù)熱20min，備用。
3. 二甲基亞砜（DMSO）在40C冰箱中冷藏30min，備用。
4. 從液氮保存罐中取出凍存管，立即放入400C水浴中，快速搖晃，直至凍存液*融化。
5. 將細(xì)胞懸液移入15ml離心管，緩慢加入4ml培養(yǎng)液，離心（1000r/min，5min）。
6. 用培養(yǎng)液懸液混懸沉淀細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞濃度，方培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
7. 記錄復(fù)蘇日期。