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細(xì)胞簡(jiǎn)介:
成纖維細(xì)胞屬于由中胚層分化而來(lái)的間質(zhì)細(xì)胞。由于這些細(xì)胞非常容易培養(yǎng),它們已經(jīng)被廣泛用于細(xì)胞和分子生物學(xué)研究中。一般而言,成纖維細(xì)胞能夠分泌 I型和III型膠原等細(xì)胞外基質(zhì),并且研究表明不同器官中的成纖維細(xì)胞有顯著的不同。傷口修復(fù)時(shí),真皮成纖維細(xì)胞由可增殖,可遷移的表型變?yōu)橛惺湛s性的,可重塑基質(zhì)的表型,同時(shí),它們會(huì)分泌大量的透明質(zhì)酸來(lái)應(yīng)對(duì)修復(fù)時(shí)的炎癥反應(yīng)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 |
種屬 |
大鼠 |
|
組織來(lái)源 |
皮膚組織 |
規(guī)格 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號(hào) |
A01X1655 |
細(xì)胞形態(tài) |
長(zhǎng)梭形細(xì)胞 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁培養(yǎng) |
細(xì)胞特性:
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常皮膚組織。
2)細(xì)胞鑒定:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:長(zhǎng)梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基:
我們推薦使用 Delf 成纖維 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
① 靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
a 細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性
b 細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L。
c 培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)。
d 胎牛血清濃度為10%-80%。
e 應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。。
f 在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮。
g 待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液
h 用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
② 懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)要求
a 原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞
b 短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行
c 細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn)。
d 長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng)。
f 細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次
g 細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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