(1)原代細胞的培養(yǎng)方法
原代細胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細胞在體外進行的培養(yǎng)，是建立細胞系的步，是一項基本技術(shù)。原代細胞接近和能反映體內(nèi)生長特性，適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
商品屬性：
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組織來源 |
脈絡(luò)膜組織 |
規(guī)格 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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細胞分類 |
大鼠原代細胞 |
培養(yǎng)條件 |
氣相：空氣，95%；CO2，5% |
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生長特性 |
貼壁 |
細胞形態(tài) |
內(nèi)皮細胞樣 |
細胞簡介：
大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細胞分離自眼球脈絡(luò)膜組織；脈絡(luò)膜在視網(wǎng)膜和鞏膜之間，含有豐富血管和色素細胞，對外力沖擊的耐受性較視網(wǎng)膜差，當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時，堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用，使脈絡(luò)膜在內(nèi)外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血。脈絡(luò)膜呈暗褐色，圍繞視神經(jīng)部有照膜，為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū)。脈絡(luò)膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜，由纖維組織、小血管和組成，軟而薄，棕紅色，在鞏膜和視網(wǎng)膜之間，續(xù)連于睫狀體后方。脈絡(luò)膜的血循環(huán)營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層，其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層及玻璃體，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同時對視覺系統(tǒng)起保護作用，對整個視覺神經(jīng)有調(diào)節(jié)作用。續(xù)連于睫狀體后方，含豐富的血管和色素細胞，有營養(yǎng)和遮光作用。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
公司正在出售的產(chǎn)品：
NRG2ELISAkit
大鼠白細胞活化黏附因子(ALCAM)elisa分析檢測試劑盒
ALCAM ELISA Kit
人基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶(MMP-8)elisa分析檢測試劑盒
MMP-8ELISAkit
腫瘤壞死因子α誘導蛋白3抗體 Anti-TNFAIP3/A20
G蛋白相關(guān)RABX5抗體 Anti-RABX5/Rabex5
泛素連接酶NEDD4-2抗體 Anti-NEDD4L/NEDD4-2
血管活性腸肽抗體 Anti-VIP
魚葡萄糖激酶(GCK)elisa分析檢測試劑盒
GCK ELISA kit
人層粘連蛋白-5(LN-5)elisa分析檢測試劑盒
LN-5ELISAKit
豚鼠白介素15(IL15)elisa檢測試劑盒
化妝品阿斯巴塘（aspartame）含量薄層色譜法定性檢測試劑盒
動物細胞超氧化物歧化酶（SOD）亞型制備試劑盒
苯丙氨酸含量測試盒
泛素樣蛋白NEDD8抗體
NEDD8
Gastrokine 3蛋白抗體
Gastrokine 3
胸腺素抗體 Anti-Thymulin
磷酸化蛋白激酶C(T500)抗體 Anti-phospho-PRKCZ(Thr500)
增食欲素B/欲B Anti-Orexin B
精子頂端體相關(guān)蛋白7抗體 Anti-SPAC7/C13ORF28
堿性磷酸酶（AP）標記的兔抗猴IgG H&L
大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細胞人6酮前列腺素(6-K-PG)elisa分析檢測試劑盒
酶（glutaminase）活性比色法（405）定量檢測試劑盒
小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)elisa檢測試劑盒
大鼠兒茶酚胺（CA）elisa檢測試劑盒
原代細胞的分離方法：
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。