(1)原代細胞的培養(yǎng)方法
原代細胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細胞在體外進行的培養(yǎng)，是建立細胞系的步，是一項基本技術。原代細胞接近和能反映體內(nèi)生長特性，適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
商品屬性：
|
組織來源 |
骨骼肌組織 |
規(guī)格 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|
細胞分類 |
大鼠原代細胞 |
培養(yǎng)條件 |
氣相：空氣，95%；CO2，5% |
|
生長特性 |
貼壁 |
細胞形態(tài) |
成纖維細胞樣 |
細胞簡介：
大鼠骨骼肌細胞分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的一種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官，有豐富的血管、分布，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張，進行隨意運動。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方。肌細胞內(nèi)有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）。明帶染色較淺，而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間，有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區(qū)段，叫做一個肌節(jié)。骨骼肌細胞也稱橫紋肌細胞，細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方，細胞多呈梭行，具有一定的方向性。骨骼肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠骨骼肌細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠骨骼肌細胞經(jīng)α-Sarcometric actin熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
公司正在出售的產(chǎn)品：
人B細胞κ 輕肽基因增強子核因子抑制因子ε(NFKBIE)elisa檢測試劑盒
大鼠中性粒細胞趨化因子-1（CINC-1）elisa檢測試劑盒
細胞CDK4蛋白表達比色法定量檢測試劑盒
小鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)elisa檢測試劑盒
阿爾新藍（ALCIAN BLUE）染色試劑盒
大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)elisa檢測試劑盒免費代測
CASPASE-5蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒
小鼠Toll樣受體2(TLR2)elisa檢測試劑盒
胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測試盒
熱休克蛋白70家族蛋白6抗體 HSPA6
溶血磷脂酸受體蛋白2抗體 LPA2
IZUMO1蛋白抗體 IZUMO1
KIAA1737蛋白抗體 KIAA1737
真核翻譯起始因子4B抗體 EIF4B
植物肌動蛋白（內(nèi)參）單克隆抗體 Plant actin(Loading Control)
鈣調(diào)蛋白激酶激酶α抗體CaMKKα CaMKK1
肝血管生成素相關蛋白4抗體 Angiopoietin-like 4
細胞色素P450 4Z2P抗體 CYP4Z2P
細胞周期調(diào)控因子P78抗體 MCRS1/p78
zeta相關蛋白70單克隆抗體 ZAP70
β-乳球蛋白抗體 Beta-lactoglobulin
ASTE1蛋白抗體 ASTE1
Beta氨基己糖苷酶beta亞基蛋白A鏈抗體 HEXB chain A
跨膜蛋白SEMA4B抗體 SEMA4B
聯(lián)會復合體蛋白3抗體 CTDSPL
面食甘露糖比色法定量檢測試劑盒
大鼠骨骼肌細胞犬Bcl-2相關X蛋白(BAX)elisa檢測試劑盒
10％Formalin固著液
小鼠巨噬細胞移動因子（MIF）elisa檢測試劑盒
大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)elisa檢測試劑盒
原代細胞的分離方法：
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。