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組織來源 |
骨 |
規(guī)格 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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細(xì)胞分類 |
大鼠原代細(xì)胞 |
培養(yǎng)條件 |
氣相：空氣，95%；CO2，5% |
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生長特性 |
貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) |
內(nèi)皮細(xì)胞樣 |
細(xì)胞簡介：
大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自骨組織；股骨頭（caput femoris）呈圓形，約占一圓球的2/3，其上完全為關(guān)節(jié)軟骨所覆蓋，在其頂部微后有一小窩，稱為股骨頭凹，為股骨頭韌帶附著處，股骨頭可由此獲得少量血供。股骨頭骨髓的微血管結(jié)構(gòu)為珊瑚狀，后微動脈與微靜脈部分膨大、迂曲、互相纏繞；骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成了骨內(nèi)微血管的內(nèi)襯，與骨內(nèi)其他成分聯(lián)系密切，參與了許多骨的病理生理過程在骨吸收新骨的形成血管再生營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)骨內(nèi)代謝產(chǎn)物輸出及維持骨內(nèi)微環(huán)境平衡方面具有重要作用。
方法簡介：
實驗室分離的大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞采用混合膠原酶消化制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31熒光鑒定，細(xì)胞純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-3代左右；2代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%胰蛋白酶，Accutase
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，凞?凞
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng)，是建立細(xì)胞系的步，是一項基本技術(shù)。原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長特性，適宜用于敏感性試驗、細(xì)胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
原代細(xì)胞的分離方法：
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機(jī)械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品：
cAMPELISAKit
胰島細(xì)胞自身抗原1抗體
ICA1
細(xì)胞相關(guān)AF4樣蛋白抗體
AFF4
DNA南方雜交印跡消除試劑盒
BL21DE3感受態(tài)細(xì)胞 20 x 100μl
微型RNA（miRNA）擴(kuò)增試劑盒
小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)elisa檢測試劑盒
三聚氰胺抗體
Melamine
1號染色體開放閱讀框124抗體
C1orf124
環(huán)指蛋白94抗體 Anti-Trim22/Staf-50/RNF94
受體輔助蛋白1抗體 Anti-REEP1
黑色素瘤硫酸軟骨素蛋白多糖4抗體 Anti-NG2/CSPG4
空泡分選蛋白18抗體 Anti-VPS18
腦腫瘤抑癌蛋白1抗體
Tomoregulin-1
凋亡誘導(dǎo)受體TNFRSF25抗體
D3R
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4增強(qiáng)因子抗體 Anti-SLC2A4RG
陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 Anti-OCT2
外周蛋白抗體 Anti-peripherin
甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1抗體 Anti-TTF1/NKX2.1
狗IgM（親和純化)
大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞人β-肌動蛋白(β-actin)elisa分析檢測試劑盒
細(xì)胞CDK1/CYCLIN B激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
小鼠醛脫氫酶1家族成員A1(ALDH1A1)elisa檢測試劑盒
大鼠核因子I/X(NFIX)elisa檢測試劑盒