商品屬性:
貨號 |
規(guī)格 |
產品名稱 |
A-PJ1117-100U |
100U |
南極熱敏UDG |
A-PJ1117-500U |
500U |
南極熱敏UDG |
儲存條件:
南極熱敏UDG置于-20°C 可保存 2 年。
產品介紹:
南極熱敏 UDG 是來源于嗜冷海洋**經大腸桿菌表達純化的的重組蛋白。
該酶能有效地水解單鏈或雙鏈DNA 上的尿嘧啶,產生的缺嘧啶位點,在高溫或高 pH下,極易水解斷裂。該酶對 RNA 無活性,主要用于 PCR擴增產物的防污染。大腸桿菌來源的尿嘧啶-DNA 糖基化酶較為耐熱,經 95℃10min 處理仍會殘留有少量的尿嘧啶-DNA 糖基化酶活性,導致含有 dU 堿基的 PCR 產物的降解。
而來源于嗜冷海洋**的熱敏型 UDG 在 50℃5min 即完全失活,在進行 PCR 擴增前,在 PCR 混合液中添加尿嘧啶-DNA 糖基化酶(熱敏性),25℃ 2min 即可消除以往 PCR 產物的殘留污染,由于尿嘧啶-DNA 糖基化酶(熱敏性)在 PCR 循環(huán)的 94℃變性一步便可被滅活,因此不會影響新的含 dU 的 PCR 產物。
活性定義:
在標準反應體系下,37°C 每分鐘催化 60 pmol尿嘧啶從含尿嘧啶的雙鏈 DNA 上釋放所需要的酶量為一個活性單位。
反應 Buffer:
ThermoLabile Uracil DNA Glycosylase (UDG)與絕大多數的 PCR 聚合酶反應緩沖液都是兼容的,但在高離子濃度(>100 mM)下活性會受到抑制。在防污染 PCR 中的使用濃度推薦為 10 mU-50 mU/μ(l 25℃下作用 2min 即可),在不同的緩沖系統(tǒng)下可能會有差別。
酶儲存液:20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM DTT, ,50% Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100, pH 7.5。
熱失活:50°C,5min。
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