
商品屬性:
貨號(hào) |
規(guī)格 |
產(chǎn)品名稱 |
A-PJ1075-100T |
100T |
Virus DNA/RNA cDNA Synthesis Kit |
儲(chǔ)存條件:
Virus DNA/RNA cDNA Synthesis Kit請(qǐng)置于-20°C,可保存 3 年;避免反復(fù)凍融。
產(chǎn)品介紹:
本試劑盒采用穩(wěn)定高效的反轉(zhuǎn)錄預(yù)混體系 5×Golden RT MasterMix 進(jìn)行 RNA 的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),使用時(shí)只需加入模 板、引物和 RNase Free H2O 即可,大大簡(jiǎn)化了操作過(guò)程、 提高了效率、減少了操作過(guò)程中的人為誤差。具有快速簡(jiǎn)便、 重復(fù)性高、特異性好、靈敏度高和穩(wěn)定性好的特點(diǎn)。專用于 病毒 DNA/RNA 樣品的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。 該預(yù)混體系包含點(diǎn)突變致 RNase H 活性缺失的 Golden MLV Reverse Transcriptase 反轉(zhuǎn)錄酶、dNTP、反應(yīng) Buffer 和 RNase Inhibitor。該試劑盒采用的反轉(zhuǎn)錄酶去除了 RNase H 活性,從而避免反轉(zhuǎn)錄過(guò)程中降解 RNA。同時(shí)經(jīng)過(guò)突變文 庫(kù)篩選,使得其熱穩(wěn)定性更強(qiáng),可耐受 55℃高溫反應(yīng)。相比 于低溫條件下反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),采用高溫反轉(zhuǎn)錄可顯著打開(kāi) RNA 二級(jí)結(jié)構(gòu),從而提高復(fù)雜 RNA 模板的擴(kuò)增性能、提高反轉(zhuǎn) 錄 cDNA 的長(zhǎng)度和產(chǎn)量,從而提高后續(xù)檢測(cè)的靈敏度。合成 的**鏈 cDNA 可廣泛用于 2nd Strand 的合成、雜交、PCR 擴(kuò)增、Real-Time PCR 反應(yīng)等。
質(zhì)量控制:
1. 按以下組分配制反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液
病毒 DNA/RNA 樣品 2~10μl
5×Golden RT MasterMix 4μl
*20×Random Primer 1μl
Rnase Free H2O Up to 20μl
*注:反轉(zhuǎn)錄引物可根據(jù)需要改用特異性引物。
2.根據(jù)實(shí)際情況反轉(zhuǎn)錄可選擇快速程序或標(biāo)準(zhǔn)程序
快速程序
37°C 15~30min(cDNA 合成)
85°C 5min(失活 MLV)
標(biāo)準(zhǔn)程序
25°C 10min(引物配對(duì))
55°C 30~60min(cDNA 合成)
85°C 5min(失活 MLV)
注:通常在定量 PCR 實(shí)驗(yàn)中使用快速程序進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄(反轉(zhuǎn)錄效率>80%),在進(jìn)行高 GC 含量、含復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)、長(zhǎng)片段的模板轉(zhuǎn)錄時(shí)采用標(biāo)準(zhǔn)程序(反轉(zhuǎn)錄效率>100%)。
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