商品屬性:
貨號 |
規(guī)格 |
產(chǎn)品名稱 |
A-Hc2025-100次 |
100次 |
多功能DNA純化回收試劑盒 |
A-Hc2025-100 次×2 |
100 次×2 |
多功能DNA純化回收試劑盒 |
儲存條件:
多功能DNA純化回收試劑盒保存條件:本試劑盒在室溫儲存 12 個月不影響使用效果。
產(chǎn)品介紹:
在高離序鹽存在的情況下,DNA 片斷選擇性的吸附于離心柱內(nèi)的硅基質(zhì)膜上,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將引物、核苷酸、蛋白、酶等雜質(zhì)去除,*后低鹽、高 pH 值的洗脫緩沖液將純凈 DNA 從硅基質(zhì)膜上洗脫。
產(chǎn)品特點:
1.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好??朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了上等溶膠液,不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽,不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨特的溶膠液/結(jié)合液配方,將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一,因此一個試劑盒可以運用于瓊脂糖 DNA 回收、PCR 產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況,節(jié)省了需購買多種試劑盒的費用。
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色,便于觀察溶膠效果和監(jiān)測 pH 值變化從而達(dá)到*佳結(jié)合效果,大大提高回收效率。
5.簡單快速、使用方便。
適用范圍:
適用于瓊脂糖凝膠 DNA 回收、PCR 反應(yīng)產(chǎn)物純化回收、酶切產(chǎn)物 DNA 片斷純化回收、探針標(biāo)記后純化回收、DNA 樣品濃縮等。
注意事項:
1.所有的溶液應(yīng)該是澄清的,如果環(huán)境溫度低時溶液可能形成沉淀,此時不應(yīng)該直接使用,可在 37℃水浴加熱幾分鐘,即可恢復(fù)澄清。使用前應(yīng)該恢復(fù)到室溫。
2.儲存于低溫(4℃或者-20℃)會造成溶液沉淀,影響使用效果,因此運輸和儲存均在室溫下(15℃-25℃)進(jìn)行。3.避免試劑長時間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH 值變化,各溶液使用后應(yīng)及時蓋緊蓋子。
4.溶膠液/結(jié)合液中含有刺激性化合物,操作時要戴乳膠手套,避免沾染皮膚,眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時,要立即用大量清水或者生理鹽水沖洗?;厥占兓?DNA片段一般在 100bp 到 40kb 之間,過長、過短片段的回收效率迅速降低。
5.回收 DNA 的量和起始 DNA 的量、洗脫體積、DNA 片斷大小有關(guān)。一般 1-20μg,100bp-5kb 的 DNA 片段,回收率可高達(dá) 85%-95%。
6.切膠回收時,紫外燈觀察對 DNA 片段有損壞作用,應(yīng)該盡可能使用能量低的長波紫外線,并且盡可能的縮短紫外線下處理的時間。
7.pH 值≤7.5 時,吸附膜吸附 DNA 的效率*高。如果切下來的凝膠中含有電泳緩沖液太多,造成溶膠后溶膠液 pH 偏高,會導(dǎo)致回收率降低。溶膠后,如果溶膠液依舊保持黃色,說明 pH 正常;如果變成橘紅色或者淡紫色,說明 pH 偏高,可在膠充分溶解后加 5-10μl 3M 醋酸鈉(pH5.2)將 pH 值調(diào)到 5-7(黃色)。
8.洗脫液 EB 不含有螯合劑 EDTA,不影響下游酶切、連接等反應(yīng)。也可以使用水洗脫,但應(yīng)該確保 pH 大于 7.5,pH 過低影響洗脫效率。用水洗脫,DNA 片段應(yīng)該保存在-20℃。DNA 片段如果需要長期保存,可以用 TE 緩沖液洗脫(10mM Tris-HCl,1mMEDTA,pH 8.0),但是 EDTA 可能影響下游酶切反應(yīng),使用時可以適當(dāng)稀釋。
自備試劑:無水乙醇
操作步驟:
提示:**次使用前請先在漂洗液 WB 中加入指定量無水乙醇,加入后請及時打鉤標(biāo)記已加入乙醇,以免多次加入!
1.瓊脂糖凝膠 DNA 回收:
1)在長波紫外燈下,用干凈刀片將所需回收的 DNA 條帶切下,盡量切除不含 DNA的凝膠,得到凝膠體積越小越好。
2)將切下的含有 DNA 條帶凝膠放入 1.5ml 離心管,稱重。
3)加 3 倍體積溶膠/結(jié)合液 DB。(凝膠重為 100mg,則加入 300μl 溶膠液)如果凝膠濃度大于 2%,應(yīng)加入 6 倍體積溶膠液。
4)56℃水浴放置 10min(或直至膠完全溶解)。每 2-3min 渦旋震蕩一次幫助加速溶解。
5)將上一步所得溶液加入吸附柱 EC 中(吸附柱放入收集管中),室溫放置1min ,12,000rpm 離心 30-60sec,倒掉收集管中的廢液。
6)加入 500μl 漂洗液 WB(請先檢查是否已加入無水乙醇!),12,000rpm 離心 30sec,棄掉廢液。
7)重復(fù)操作步驟 6。
8)將吸附柱 EC 放回空收集管中,12,000rpm 離心 2min,盡量去除漂洗液,以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應(yīng)。
9)取出吸附柱 EC,放入一個干凈的離心管中,室溫放置數(shù)分鐘。
10)在吸附膜的中間部位滴加洗脫緩沖液 EB(洗脫緩沖液事先在 65-70℃水浴中加熱效果更好),室溫放置 2min,12,000rpm 離心 1min。如果需要較多量 DNA,可將得到的溶液重新加入吸附柱中,離心 1min。(注意:洗脫體積不應(yīng)小于 30μl,體積過少影響回收效率)
2.PCR 產(chǎn)物或者酶切片段等 DNA 純化:
1)每 100μlPCR 擴(kuò)增后體系或者酶切后體系加入 500μl 溶膠/結(jié)合液 DB,充分混勻。(如果初始體系小于 100μl,請事先用雙蒸水調(diào)整至 100μl)。
2)將上一步所得溶液加入吸附柱 EC 中(吸附柱放入收集管中),室溫放置 1min,12,000rpm 離心 30-60sec,倒掉收集管中的廢液。
3)從此步驟開始和瓊脂糖凝膠 DNA 回收的操作步驟 6-10 完全一致,請參見瓊脂糖凝膠 DNA 回收的操作步驟 6-10。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Taq DNA Polymerase(7U/ul,Buffer+)聚合酶 Taq酶 |
布氏旋毛蟲PCR試劑盒 |
2×Taq PCR MasterMix( 含綠染料 ) 3×Taq Mix預(yù)混液 |
環(huán)形泰勒蟲PCR試劑盒 |
拭子RNA提取試劑盒(帶證,膜吸附柱法) |
阿留申病毒PCR檢測試劑盒 |
溶液A(僅用于質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染) |
偽牛痘病毒PCR檢測試劑盒 |
2×Long Taq PCR MasterMix( 含綠染料)(2×Taq Mix長片段擴(kuò)增預(yù)混液) |
鯽魚源性成分PCR試劑盒 |
1×sPfu MasterMix(purple)1×即用型高保真預(yù)混液 |
人支原體PCR試劑盒 |
組織DNA提取試劑盒 |
屎腸球菌PCR試劑盒 |
中大量質(zhì)粒富集提取試劑盒 |
寄生曲霉PCR檢測試劑盒 |
質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染試劑盒 |
寄生曲霉PCR檢測試劑盒直銷 |
一步染料法RT-qPCR試劑盒 |
腎綜合癥出血熱病毒PCR檢測試劑盒 |
液基因組 DNA 提取系統(tǒng)(0.1-11ml鹽析法) |
布魯氏菌核suan熒光PCR檢測試劑盒(探針法) |
清漿TaqMan miRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒 |
抗高爾基體抗體ELISA試劑盒 |
蝦堿性磷酸酶(SAP) |
α1-B-糖蛋白ELISA試劑盒 |
無內(nèi)**高純質(zhì)粒大量提取試劑盒 |
多功能DNA純化回收試劑盒組織蛋白mei抗體ELISA試劑盒 |
外泌體RNA提取試劑盒 |
α黑色su細(xì)胞刺激suELISA試劑盒 |