商品屬性：

儲存條件：

高純質(zhì)粒小提中量快速提取試劑盒保存條件：本產(chǎn)品收到后按照上面指示溫度存放各成份，儲存 18 個月不影響使用效果。

產(chǎn)品介紹：

本試劑盒采用改進 SDS-堿裂解法裂解細胞，離心吸附柱內(nèi)的硅基質(zhì)膜在高鹽、低pH 值狀態(tài)下選擇性地結(jié)合溶液中的質(zhì)粒 DNA，再通過去蛋白液和漂洗液將雜質(zhì)和其它**成分去除，*后低鹽、高 pH 值的洗脫緩沖液將純凈質(zhì)粒 DNA 從硅基質(zhì)膜上洗脫。

產(chǎn)品特點：
1.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復性好。克服了國產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.獨有的去蛋白液配方，可以高效去除殘留的核酸酶，即使是核酸酶含量豐富的菌株如 JM 系列、HB101 也可以輕松去除。有效防止了質(zhì)粒被核酸酶降解。
3.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑，也不需要乙醇沉淀。獲得的質(zhì)粒產(chǎn)量高、純度好， 可以直接用于酶切、轉(zhuǎn)化、PCR、體外轉(zhuǎn)錄、測序等各種分子生物學實驗。

注意事項：

1.**次使用時，將試劑盒所帶的全部 RNase A 加入溶液 P1 后（終濃度 100ug/ml）置于 4℃保存。如果溶液 P1 中 RNase A 失活，提取的質(zhì)?？赡軙形⒘?RNA 殘留，在溶液 P1 中補加 RNase A 即可。
2.環(huán)境溫度低時溶液 P2 中 SDS 可能會析出渾濁或者沉淀，可在 37℃水浴加熱幾分鐘，即可恢復澄清，不要劇烈搖晃，以免形成過量的泡沫。
3.避免試劑長時間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH 值變化。
4.溶液 P3 和去蛋白液 PD 中含有刺激性化合物，操作時要戴乳膠手套，避免沾染皮膚、眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時，要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
5.提取質(zhì)粒的量與**培養(yǎng)濃度、質(zhì)?？截悢?shù)等因素有關(guān)。一般高拷貝質(zhì)粒，建議接種單菌落于 5ml-15ml 加合適***的 LB 培養(yǎng)基，過夜培養(yǎng) 14-16 個小時，可提取出多達 70μg 的純凈質(zhì)粒。如果所提質(zhì)粒為低拷貝質(zhì)?；虼笥?10kb 的大質(zhì)粒，應(yīng)適當加大菌體使用量，同時按比例增加 P1、P2、P3 的用量，其它步驟相同。
6..得到的質(zhì)粒 DNA 可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。OD260 值為 1 相當于大約 50μg/ml DNA。電泳可能為單一條帶，也可能為 2 條或者多條 DNA條帶，這主要是不同程度的超螺旋構(gòu)象質(zhì)粒泳動位置不一造成，與提取物培養(yǎng)時間長短、提取時操作劇烈程度等有關(guān)。本公司產(chǎn)品正常操作情況下基本超螺旋可以超過 90%。
7.洗脫液 EB 不含有螯合劑 EDTA，不影響下游酶切、連接等反應(yīng)。也可以使用水洗脫，但應(yīng)該確保 pH 大于 7.5，pH 過低影響洗脫效率。用水洗脫質(zhì)粒應(yīng)該保存在-20℃。質(zhì)粒 DNA 如果需要長期保存，可以用 TE 緩沖液洗脫（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是 EDTA 可能影響下游酶切反應(yīng)，使用時可以適當稀釋。
自備試劑：無水乙醇

操作步驟：

提示：
? **次使用前請先在漂洗液 WB 瓶中加入指定量無水乙醇，充分混勻，加入后請及時在方框打鉤標記已加入乙醇，以免多次加入!
? 將 RNase A 全部加入溶液 P1 中，混勻，每次使用后置于 2-8℃保存。
? 將溶液 P3 放在冰上預冷。
1.可選步驟：向吸附柱 BC 中 （吸附柱放入收集管中）加 500μl 平衡液 BL，12,000rpm 離心 1 min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。（請使用當天處理柱子。）
2.取 5-15 ml 過夜培養(yǎng)的菌液，12,000rpm 離心 1 min，盡可能倒干上清，收集菌體。
3.用 500μl 溶液 P1 重懸菌體沉淀，渦旋振蕩至徹底懸浮。
4.加 500μl 的溶液 P2，溫和地上下翻轉(zhuǎn) 4 -7 次使菌體充分裂解。
5.加 700μl 溶液 P3，立即溫和地上下翻轉(zhuǎn) 4 -7 次，充分混勻時會出現(xiàn)白色絮狀沉淀。12,000rpm 離心 10 min，小心取上清。
6.將上一步所得上清分次加入吸附柱 BC 中（吸附柱放入收集管中）， 12,000rpm 離心 30-60 sec，倒掉收集管中的廢液。
7.可加入 500μl 去蛋白液 PD，12,000rpm 離心 30-60 sec，棄廢液。
8.加入 500μl 漂洗液 WB（請先檢查是否已加入無水乙醇！），12,000rpm 離心 30 sec，棄掉廢液。
9.重復步驟 8。
10.將吸附柱 BC 放回空收集管中，12,000rpm 離心 2 min，將吸附柱置于室溫放置數(shù)分鐘，以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液, 以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應(yīng)。
11.取出吸附柱 BC，放入一個干凈的離心管中，向吸附膜的中間部位加 100μl 洗脫緩沖液 EB（洗脫緩沖液事先在 65-70℃水浴中加熱效果更好），室溫放置 2 min，12,000rpm 離心 1 min。如果需要較多量質(zhì)粒，可將得到的溶液重新加入離心吸附柱中，離心 1 min，將質(zhì)粒溶液收集到離心管中。

公司正在出售的產(chǎn)品：