
公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
Hep3B2.CQ-E7[Hep3B,Hep-3B,Hep3B]細(xì)胞 |
詳見說明書 |
FS-X5451 |
產(chǎn)品名稱:肝癌細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
白屈菜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Auramine O 干擾素相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白1抗體(神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白PC4)包裝50g
白屈菜紅堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sodium 2,3-dimercapto-1-propanesulfonate抑制凋亡樣蛋白2抗體包裝5g
白芍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ammonium ceric sulfate干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體包裝25g
白術(shù)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Thioacetamide干擾素誘導(dǎo)蛋白44抗體包裝5g
白術(shù)內(nèi)酯III(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sulforhodamine 101; Sulforhodamine 6405-三磷酸肌受體3抗體包裝25g
白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3-Indoleacetic acid干擾素omega 1蛋白抗體包裝5g
白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ;蒼術(shù)內(nèi)酯II(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Folic acid干擾素alpha 7蛋白抗體包裝100g
白頭翁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Folic acid干擾素β抗體包裝25g
白頭翁皂苷A3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tofacitinib(CP-690550,Tasocitinib) DNA結(jié)合抑制因子1抗體包裝1g
白頭翁皂苷B英文名稱: 1-Naphthylacetic acidγ干擾素誘導(dǎo)蛋白202抗體包裝250mg
白頭翁皂苷B4(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Chromotrope 2R腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體包裝25g
白頭翁皂苷E英文名稱: Phosphomolybdic acid hydrate生長抑制因子基因1抗體包裝5g
白頭翁皂苷E-1英文名稱: Glycine白介素8抗體包裝100g
白頭翁皂苷E-2英文名稱: Glycine整合素連接激酶-1抗體包裝25g
白頭翁皂苷E-3英文名稱: L-Glycine磷酸化KB抑制蛋白激酶α抗體包裝500g
Hep3B2.CQ-E7[Hep3B,Hep-3B,Hep3B]細(xì)胞枯草芽孢桿菌Human LARP7(La-related protein 7) ELISA KitAlias: LARP7|La-relatedprotein7|Laribonucleoproteindomainfamilymember7|P-TEFb-interactionproteinfor7SKstability|PIP7S|HDCMA18PELISAKitReactivity: Human
異常漢遜酵母異常變種Human DDX42(ATP-dependent RNA helicase DDX42) ELISA KitAlias: DDX42|ATP-dependentRNAhelicaseDDX42|Splicingfactor3B-associated125kDaprotein|SF3b125|SF3bDEADboxprotein|RNAhelicase-relatedprotein|RNAHP|DEADboxprotein42|RNAhelicase-likeprotein|RHELPELISAKitReactivity: Human
冠突散囊菌Human COL10A1(Collagen alpha-1(X) chain) ELISA KitAlias: COL10A1|Collagenalpha-1(X)chain|COL10-A1|CollagenTypeX|COL10ELISAKitReactivity: Human
大腸埃希氏菌Human SORD(Sorbitol dehydrogenase) ELISA KitAlias: SORD|SDH|Sorbitoldehydrogenase|L-iditol2-dehydrogenaseELISAKitReactivity: Human
赤曲霉Human ZEB1(Zinc finger E-box-binding homeobox 1) ELISA KitAlias: ZEB1|ZincfingerE-box-bindinghomeobox1|Transcriptionfactor8|TCF-8|NIL-2-Azincfingerprotein|NegativeregulatorofIL2|AREB6|TCF8|BZP|DELTAEF1|FECD6|NIL2A|PPCD3|ZFHEP|delta-crystallinenhancerbindingfactor1|NegativeregulatorofIL2|posteriorpolymorphouscornealdystrophy3|TCF8BZP|repressesinterleukin2expression|ZEB|Zfhep|ZFHEP|ZFHX1A|Zfhx1aELISAKitReactivity: Human
橢圓孫秀芹氏菌Human DTNBP1(Dysbindin) ELISA KitAlias: DTNBP1|Dysbindin|Hermansky-Pudlaksyndrome7protein|HPS7protein|Hermansky-Pudlaksyndrome7protein|HPS7protein|Dysbindin-1|BLOC-1subunit8|Dystrobrevin-bindingprotein1|My031|BLOC1S8|DBND|HPS7ELISAKitReactivity: Human
雙胞雙鐮孢Human MTOR(Serine/threonine-protein kinase mTOR) ELISA KitAlias: MTOR|Serine|threonine-proteinkinasemTOR|Rapamycintargetprotein1|Rapamycintargetprotein1|RAPT1|Mechanistictargetofrapamycin|Mammaliantargetofrapamycin|mTOR|FK506-bindingprotein12-rapamycincomplex-associatedprotein1|FKBP12-rapamycincomplex-associatedprotein|FRAP|FRAP1|FRAP2ELISAKitReactivity: Human
桃色枝頂孢Human ZEB2(Zinc finger E-box-binding homeobox 2) ELISA KitAlias: ZEB2|ZincfingerE-box-bindinghomeobox2|Smad-interactingprotein1|SMADIP1|Zincfingerhomeoboxprotein1b|SIP1|SIP-1|ZFHX1B|HSPC082|HRIHFB2411|KIAA0569|ZFHX1B|ZFX1BELISAKitReactivity: Human