公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

矮地茶（標準品）英文名稱： Fluorescein球蛋超家族成員8抗體包裝5g

艾黃素;六棱菊亭(標準品)英文名稱： Calcein白介素33抗體包裝25g

艾葉（標準品）英文名稱： Wright's stain核蛋白9抗體（Ran結(jié)合蛋白M）包裝25ml

安格洛苷 C（標準品）英文名稱： Giemsa stain真核翻譯起始因子3A抗體包裝5ml

安石榴甙（標準品）英文名稱： 6-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester磷酸化真核翻譯起始因子4G抗體包裝1g

安五脂素（標準品）英文名稱： 6-Carboxyfluorescein整合素α4β7抗體包裝5g

安息香（標準品）英文名稱： 5-Carboxyfluorescein磷酸化干擾素調(diào)節(jié)因子3抗體包裝10MG

澳茄新堿(標準品)英文名稱： Nigrosine water solubleISLR2蛋白抗體包裝1g

澳洲茄;澳州茄（標準品）英文名稱： Nigrosin alcohol solubleIQCG蛋白抗體包裝250mg

澳洲茄邊堿（標準品）英文名稱： 7-HydroxycoumarinIQCK蛋白抗體包裝1g

澳洲茄堿（標準品）英文名稱： HeminDNA結(jié)合抑制因子1抗體包裝250mg

八角楓（標準品）英文名稱： 5-Carboxyfluorescein diacetate肌苷單磷酸脫氫酶1抗體包裝25g

八角茴香（標準品）英文名稱： 5(6)-Carboxyfluorescein diacetate干擾素誘導蛋白P78抗體包裝5g

八角蓮（標準品）英文名稱： 5-Aminofluorescein間粘附分子5抗體包裝100g

八角麻（標準品）英文名稱： 6-Aminofluorescein肌單磷酸酶IMPA3抗體包裝25g
HELAXB細胞南極類芽孢桿菌Human LOXL2(Lysyl oxidase homolog 2) ELISA KitAlias: LOXL2|LysylOxidaseHomolog2|LOL2|LOR2|lysyloxidaserelated2|lysyloxidase-like2|Lysyloxidase-likeprotein2|Lysyloxidase-relatedprotein2|Lysyloxidase-relatedproteinWS9-14|WS9-14ELISAKitReactivity: Human

猬木霉Human FMOD(Fibromodulin) ELISA KitAlias: FMOD(Fibromodulin)|FM|SLRR2E|Collagen-binding59kDaprotein|fibromodulinproteoglycan|KeRatansulfateproteoglycanfibromodulinELISAKitReactivity: Human

溶血不動桿菌基因型4Human FAM132B(Protein FAM132B) ELISA KitAlias: Erythroferrone|ProteinFAM132B|ComplementC1qtumornecrosisfactor-relatedprotein15|Myonectin|C1QTNF15|CTRP15ELISAKitReactivity: Human

貝倫格葡萄座腔菌Human DTNBP1(Dysbindin) ELISA KitAlias: DTNBP1|Dysbindin|Hermansky-Pudlaksyndrome7protein|HPS7protein|Hermansky-Pudlaksyndrome7protein|HPS7protein|Dysbindin-1|BLOC-1subunit8|Dystrobrevin-bindingprotein1|My031|BLOC1S8|DBND|HPS7ELISAKitReactivity: Human

鴨疫里氏桿菌Human ZEB1(Zinc finger E-box-binding homeobox 1) ELISA KitAlias: ZEB1|ZincfingerE-box-bindinghomeobox1|Transcriptionfactor8|TCF-8|NIL-2-Azincfingerprotein|NegativeregulatorofIL2|AREB6|TCF8|BZP|DELTAEF1|FECD6|NIL2A|PPCD3|ZFHEP|delta-crystallinenhancerbindingfactor1|NegativeregulatorofIL2|posteriorpolymorphouscornealdystrophy3|TCF8BZP|repressesinterleukin2expression|ZEB|Zfhep|ZFHEP|ZFHX1A|Zfhx1aELISAKitReactivity: Human

抗生鏈霉菌Human EBLN1(Endogenous Bornavirus-like nucleoprotein 1) ELISA KitAlias: EBLN1|EndogenousBornavirus-likenucleoprotein1|EndogenousBorna-likeNelement-1|EBLN-1ELISAKitReactivity: Human

黃桿菌Human SORD(Sorbitol dehydrogenase) ELISA KitAlias: SORD|SDH|Sorbitoldehydrogenase|L-iditol2-dehydrogenaseELISAKitReactivity: Human

小孢根霉原變種Human MTOR(Serine/threonine-protein kinase mTOR) ELISA KitAlias: MTOR|Serine|threonine-proteinkinasemTOR|Rapamycintargetprotein1|Rapamycintargetprotein1|RAPT1|Mechanistictargetofrapamycin|Mammaliantargetofrapamycin|mTOR|FK506-bindingprotein12-rapamycincomplex-associatedprotein1|FKBP12-rapamycincomplex-associatedprotein|FRAP|FRAP1|FRAP2ELISAKitReactivity: Human