實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個；
4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號
MGH-U1細胞
詳見說明書
FS-X5413
產(chǎn)品名稱：膀胱癌細胞
培養(yǎng)基：DMEM高糖90%，胎牛血清10%（1521/1531）
狀態(tài)：上皮細胞
公司細胞現(xiàn)貨供應，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
洋薊素;1,5-二咖啡?？鼘幩?標準品)英文名稱： L-Histidine monohydrate monohydrochlorideHAUS5蛋白抗體包裝1ml
氧代川南亭堿（標準品）英文名稱： L-Homoarginine Hydrochloride 組織H4受體抗體包裝1ml
氧化白藜蘆(標準品)英文名稱： TPCKmRNA cap基轉(zhuǎn)移酶抗體包裝1ml
氧化白藜蘆-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱： TPCK5’-三磷酸聚核苷酸抗體包裝1g
氧化白藜蘆-3'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱： Ala-Gln 組氨酸三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體包裝25g
氧化槐定堿(標準品)英文名稱： H-Arg-OMe·2HCl狀腺促進alpha鏈包裝5g
氧化槐果堿（標準品）英文名稱： D-Alaninamide hydrochlorideA型流感病H7N9凝集素抗體包裝1g
氧化苦參堿(標準品)英文名稱： Fenticonazole Nitrate組蛋白去乙?；?抗體包裝250mg
氧化前胡素(標準品)英文名稱： 1-Benzyl D-Glutamate人乙肝表面抗原抗體（包被）包裝5g
氧化芍藥苷,羥基芍藥苷(標準品)英文名稱： D-Phenylalanine 腎損傷分子1抗體（型肝炎病受體1）包裝1ml
藥根堿(標準品)英文名稱： D-Alanine組氨酸富含脯氨酸糖蛋白抗體包裝1ml
野百合堿（標準品）英文名稱： β-AlanineHER3受體抗體包裝100g
野黃芩苷(標準品）英文名稱： β-Alanine磷酸化HER3受體抗體包裝25g
野黃芩素(標準品)英文名稱： D-Tryptophan磷酸化HER3受體抗體包裝100g
大腸埃希氏菌Human CHRM3(Muscarinic acetylcholine receptor M3) ELISA KitAlias: CHRM3|HM3|mAChRM3|cholinergicreceptor|muscarinic3|m3muscarinicreceptor|muscarinicacetylcholinereceptorM3ELISAKitReactivity: Human
類芽孢桿菌屬Human KSR2(Kinase suppressor of Ras 2) ELISA KitAlias: KSR2|hKSR2(KinasesuppressorofRas2)ELISAKitReactivity: Human
亞細亞菌屬Human VCL(Vinculin) ELISA KitAlias: VCL(Vinculin)|MVCL|CMD1W|CMH15|MetavinculinELISAKitReactivity: Human
東方伊薩酵母Human VCAN(Versican core protein) ELISA KitAlias: VCAN(Versicancoreprotein)|CSPG2|GHAP|PG-M|Chondroitinsulfateproteoglycan2|WGN|Chondroitinsulfateproteoglycancoreprotein2|ERVR|Glialhyaluronate-bindingprotein|Largefibroblastproteoglycan|WGN1|versican|versicanproteoglycanELISAKitReactivity: Human
根瘤菌Human KRT17(KeRatin, type I cytoskeletal 17) ELISA KitAlias: CK-17|KRT17(CytokeRatin17)|K17|KeRatin-17|39.1|CytokeRatin-17|KeRatin|typeIcytoskeletal17ELISAKitReactivity: Human
青紫鏈霉菌Human TNNT1(Troponin T, slow skeletal muscle) ELISA KitAlias: TNNT1(TroponinTType1|SlowSkeletal)|TNT|TnTs|sTnT|SlowskeletalmuscletroponinT|TroponinT|slowskeletalmuscleELISAKitReactivity: Human
北方蜜環(huán)菌Human S100A9(Protein S100-A9) ELISA KitAlias: S100A9(S100CalciumBindingProteinA9)|CalgranulinB|MRP-14|CAGBMigRationinhibitoryfactor-relatedprotein14|Calgranulin-B|CalprotectinL1Hsubunit|CGLB|L1AG|LIAG|MRP14LeukocyteL1complexheavychain|NIF|P14|proteinS100-A9ELISAKitReactivity: Human
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、50ml離心筒2個
來源：BSL-1
洋川芎內(nèi)酯I(標準品)英文名稱： L-Alanamine Hydrochloride絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶蛋白抗體包裝25g
MGH-U1細胞炭黑曲霉Human ADAMTS4(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 4) ELISA KitAlias: ADAMTS4|ADAMTS2|ADMP-1|ADAM-TS4|ADAMTS-2|ADAM-TS4|ADAMTS-4|Aggrecanase1|adisintegrin-likeandmetalloprotease(reprolysintype)withthrombospondintype1motif|4|ADAMmetallopeptidasewiththrombospondintype1motif|4|Adisintegrinandmetalloproteinasewiththrombospondinmotifs4ELISAKitReactivity: Human
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：