實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；
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產品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
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MC57G細胞 |
詳見說明書 |
FS-X5403 |
產品名稱：小鼠纖維肉瘤細胞
來源：纖維肉瘤；C57BL/6J
培養(yǎng)基：1640
狀態(tài)：貼壁
公司細胞現(xiàn)貨供應，質量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
西藏棱子芹（標準品）英文名稱： L-Valine肺癌相關蛋白8抗體包裝1g
西河柳（標準品）英文名稱： L-Isoleucine型肝炎病NS5A抗體包裝25g
西紅花（標準品）英文名稱： L-Isoleucine組蛋白H2AX抗體包裝5g
西紅花苷II（標準品）英文名稱： L-Threonine同源結構域轉錄因子HESX1抗體包裝1g
西紅花苷I（標準品）英文名稱： DL-Threonine同源結構域轉錄因子HESX1抗體包裝1g
西青果（標準品）英文名稱： L-Phenylalanine同源盒蛋白HOX13抗體包裝250mg
西瑞香素（標準品）英文名稱： L-Asparagine Monohydrate同源盒轉錄因子8抗體包裝5g
西洋參（標準品）英文名稱： L-Methionine人絨毛膜促性腺β亞基單抗包裝1g
菥蓂（標準品）英文名稱： L-Methionine人類狀瘤病18 E6抗體包裝100g
溪黃草(線紋香茶菜）（標準品）英文名稱： L-Cystine人類狀瘤病16-E7抗體包裝25g
豨薟草（豨薟）（標準品）英文名稱： L-Cystine hydrochloride核基質p84蛋白抗體包裝5g
洗碗葉（標準品）英文名稱： L-Cysteine組蛋白H3樣抗體包裝5g
喜馬拉雅紫**（標準品）英文名稱： L-Cysteine組蛋白H3樣抗體包裝25g
喜樹堿（標準品）英文名稱： L-Cysteine hydrochloride monohydrate聚組氨酸抗體標簽抗體包裝5g
細辛（北細辛）（標準品）英文名稱： DL-Cysteine 艾滋病病抗體包裝1g
MC57G細胞土曲霉Human ADAMTS7(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 7) ELISA KitAlias: ADAMTS7(ADisintegrinAndMetalloproteinaseWithThrombospondin7)|COMPaseELISAKitReactivity: Human
糙皮側耳Human EDA(Ectodysplasin-A) ELISA KitAlias: EDA(Ectodysplasin-A)|EDAproteinhomolog|Tabbyprotein|ED1|HED|EDA1|EDA2|HED1|ODT1|XHED|ECTD1|XLHED|ED1-A1|ED1-A2|EDA-A1|EDA-A2|STHAGX1|EctodermaldysplasiaproteinELISAKitReactivity: Human
尼阿布芽孢桿菌Human TNC(Tenascin) ELISA KitAlias: TNC(TenascinC)|Tenascin|JI|Hexabrachion|Glioma-associated-extracellularmatrixantigen|GP150-225|Neuronectin|Myotendinousantigen|Cytotactin|GMEM|HXB|TenascinJ1|Cytotactin|Glioma-associated-extracellularmatrixantigen|Hexabrachion|hexabrachion(tenascin)|HXBcytotactin|TN-C|TNGPELISAKitReactivity: Human
普通變形桿菌Human IL36A(Interleukin-36 alpha) ELISA KitAlias: IL36A(Interleukin-36alpha)|FIL1epsilon|IL-1E|IL1F6|FIL1|FIL1epsilon|FIL1(EPSILON)|FIL1E|IL-1epsilon|IL1(EPSILON)|IL1E|IL1F6|IL-1F6|IL-1F6(FIL-1-epsilon)|interleukin1family|member6(epsilon)|interleukin1|epsilon|Interleukin36|Alpha|Interleukin-1epsilon|interleukin-1familymember6|Interleukin-36AlphaELISAKitReactivity: Human
橙鱗傘2Human HPX(Hemopexin) ELISA KitAlias: HPX(Hemopexin)|Beta-1B-glycoprotein|beta-1B-glycoprotein||hemopexin|HXELISAKitReactivity: Human
北里胞菌Human MAPT(Microtubule-associated protein tau) ELISA KitAlias: MAPT(Microtubule-associatedproteintau)|TAU|MSTD|PPND|DDPAC|MAPTL|MTBT1|MTBT2|FTDP-17|Neurofibrillarytangleprotein|Pairedhelicalfilament-tauELISAKitReactivity: Human
羊無漿體（青海海宴株）Human TLR5(Toll-like receptor 5) ELISA KitAlias: TLR5(Toll-likereceptor5)|TIL3|SLEB1|Toll|interleukin-1receptor-likeprotein3|TIL-3|TIL3Toll|interleukin-1receptor-likeprotein3|toll-likereceptor5ELISAKitReactivity: Human
鮑姆針層孔菌Human PRKACB(cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit beta) ELISA KitAlias: PRKACB(cAMP-dependentproteinkinasecatalyticsubunitbeta)ELISAKitReactivity: Human
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。