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產(chǎn)品名稱：漿細胞骨髓瘤細胞
來源：漿細胞骨髓瘤；女性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：半貼壁
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

吳茱萸次堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： NBD-F羥類固脫氫酶17β3抗體包裝250g

吳茱萸堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： luminol羥基類固脫氫酶11β1抗體包裝25g

梧桐子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： BAEE滋養(yǎng)層抗原3β-HSD抗體包裝5g

五倍子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： N-Acetyl-L-tyrosine ethyl ester monohydrate 乙?；M蛋白H4抗體包裝100g

五倍子（青麩楊）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： D-Glucose 6-phosphate sodium salt 磷酸化高遷移率核小體結(jié)合蛋白1包裝25g

五加皮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： bisBenzimide H 33258 附睪分泌蛋白4抗體包裝1g

五靈脂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： bisBenzimide H 33342 trihydrochloride三基化組蛋白H3抗體包裝5g

五合硫酸金雀花堿/硫酸鷹爪豆堿英文名稱： Fluo 3-AM 三羥基三基輔酶A還原酶抗體包裝100g

五味藤（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Indo 1-AM硫酸乙酰肝素蛋白多糖2包裝25g

五味子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Fluo 4-AM肝癌相關(guān)抗原h(huán)ca25a包裝250ml

五味子素（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 7-Amino-4-methylcoumarin 己糖激酶3抗體包裝50ml

五味子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： IPI-145 (INK1197)人乙肝病pre S1/S2蛋白抗體包裝50mg

五味子乙（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： X-NeuNAc 人乙肝病pre S1蛋白抗體包裝1g

五味子酚（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： N-(4-Aminobutyl)-N-ethylisoluminol己糖激酶1抗體包裝5g

五味子素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Tetradecyltrimethylammonium chloride己糖激酶2抗體包裝25g
AMO-1細胞多主葡萄殼菌Human DEFB129(Beta-defensin 129) ELISA KitAlias: DEFB129(Beta-defensin129)|Beta-defensin29|DEFB-29|Defensin|beta129ELISAKitReactivity: Human

喜鹽裸囊菌Human PYY3(Putative peptide YY-3) ELISA KitAlias: PYY3(PutativepeptideYY-3)ELISAKitReactivity: Human

沙鏈霉菌Human PYY3(Putative peptide YY-3) ELISA KitAlias: PYY3(PutativepeptideYY-3)ELISAKitReactivity: Human

葡萄座腔菌Human ZBED3(Zinc finger BED domain-containing protein 3) ELISA KitAlias: ZBED3(ZincfingerBEDdomain-containingprotein3)|Axin-interactingproteinELISAKitReactivity: Human

出芽短梗霉Human WTIP(Wilms tumor protein 1-interacting protein) ELISA KitAlias: WTIP(Wilmstumorprotein1-interactingprotein)|WT1-interactingproteinELISAKitReactivity: Human

微型離心機 (便攜式)Human CCR6(C-C chemokine receptor type 6) ELISA KitAlias: CCR6(C-Cchemokinereceptortype6)|CD196|GPR29|GPR-CY4|STRL22|BN-1|CC-CKR-6|CCR-6|CD196antigen|chemokine(C-Cmotif)receptor6|CKR-L3G-proteincoupledreceptor29|CKRL3LARCreceptor|CMKBR6|DRY6|GPR29|C-CCKR-6|DRY-6|lymphocyte|22ELISAKitReactivity: Human

產(chǎn)氨短桿菌Human UNC13C(Protein unc-13 homolog C) ELISA KitAlias: UNC13C(Proteinunc-13homologC)ELISAKitReactivity: Human

三七根腐病菌Human DEFB127(Beta-defensin 127) ELISA KitAlias: DEFB127(Beta-defensin127)|Beta-defensin27|DEFB-27|Defensin|beta127ELISAKitReactivity: Human