產(chǎn)品名稱：食管鱗癌細(xì)胞
來源：食管鱗癌；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

脫氧野尻霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： E64d,E-64d組蛋白H2AZ抗體包裝5g

拓?fù)涮婵蝶}酸鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： dCMP,2Na熱休克因子2結(jié)合蛋白抗體包裝1g

瓦松（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2'-Deoxyadenosine 5'-monophosphateHEATR2蛋白抗體包裝1g

萬丈深（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： FAD-Na2鐵硫簇整合同源物2蛋白抗體包裝25g

萬丈深（綠莖還陽參）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： GTP, 3sodium Salt麻疹病血凝素抗體包裝5g

王不留行（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5-IMP，2Na同源盒蛋白HOXC5抗體包裝1g

王不留行環(huán)肽A英文名稱： Uridine 5'-diphosphate sodium salt from 轉(zhuǎn)錄因子HES4抗體包裝5g

王不留行環(huán)肽B英文名稱： 5'-UMP-Na2造血干特異性相關(guān)結(jié)合蛋白3抗體包裝1g

王不留行黃酮苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2-Deoxyadenosine-5-Monophosphate Disodium salt(dAMP-Na2)HDHD1蛋白抗體包裝5g

威靈仙(綿團(tuán)鐵線蓮）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5'-ATP-Na2HDHD2蛋白抗體包裝100g

威靈仙（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Apatinib(YN968D1)宿主因子1抗體包裝25g

維采寧2英文名稱： cAMP組蛋白H2A/S抗體包裝5g

維生素B2（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： cAMP組受體H2抗體包裝100g

維生素D2（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cytidine 5'-monophosphate 磷酸化組受體H1抗體包裝25g

維斯阿米-4'-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→6)-...英文名稱： 5-Formylsalicylic acid同源盒蛋白HOXA11抗體包裝5g
TE14細(xì)胞枯草芽孢桿菌Human APOD(Apolipoprotein D) ELISA KitAlias: ApoD|APOD|apolipoproteinDELISAKitReactivity: Human

刺芹側(cè)耳（杏鮑菇）Human CXCR4(C-X-C chemokine receptor type 4) ELISA KitAlias: CXCR4|ChemokineC-X-C-MotifReceptor|Stromalcell-derivedfactor1receptor(SDF-1receptor)|Leukocyte-derivedseventransmembranedomainreceptor(LESTR)|Fusin|LCR1|CD184|Fusin|chemokine(C-X-Cmotif)receptor4|C-X-Cchemokinereceptortype4|CXC-R4||D2S201ESDF-1receptor|FB22|Fusin|HM89NPYRL|HSY3RR|LAP3|LCR1|LESTRCD184antigen|Leukocyte-derivedseventransmembranedomainreceptor|lipopolysaccharide-associatedprotein3|neuropeptideYreceptorY3|NPY3RWHIM|NPYR|NPYY3R|seventransmembranehelixreceptor|seven-transmembrane-segmentreceptor|spleen|Stromalcell-derivedfactor1receptoELISAKitReactivity: Human

巨型艾美耳球蟲Human AMY2(Amylase Alpha 2, Pancreatic) ELISA KitAlias: AMY2|Pancreaticalpha-amylase|1|4-alpha-D-glucanglucanohydrolaseELISAKitReactivity: Human

嗜熱鏈球菌Human DNMT1(DNA(cytosine-5)-methyltransferase 1) ELISA KitAlias: DNMT1(DNA(cytosine-5)-methyltransferase1)|CXXC9|MCMT|AIM|CXXC9CXXCfingerprotein9|CXXC-typezincfingerprotein9|DNA(cytosine-5-)-methyltransferase1|DNA(cytosine-5)-methyltransferase1|DNAmethyltransferase1|DNAmethyltransferaseHsaI|DNAMTaseHsaI|DNMTELISAKitReactivity: Human

瑟氏泰勒蟲（清水株）Human GREM1(Gremlin-1) ELISA KitAlias: GREM1(GremLin1)|DAND2|DRM|CellprolifeRation-inducinggene2protein|CKTSF1B1|gremLin1|cysteineknotsuperfamily|homolog|DANdomainfamilymember2|GREMLIN|Down-regulatedinMos-transformedcellsprotein|DRMM|gremLin|gremLin-1|gremLin1-likeprotein|IHG-2|Increasedinhighglucoseprotein2|increasedinhighglucose-2|prolifeRation-inducinggene2ELISAKitReactivity: Human

Human TERT(Telomerase reverse transcriptase) ELISA KitAlias: TERT(TelomeraseReverseTranscriptase)|CMM9|DKCA2|DKCB4|EST2|PFBMFT1|TCS1|TP2|TRT|Telomerase-associatedprotein2|TelomerasecatalyticsubunitELISAKitReactivity: Human

釀酒酵母Human IL17B(Interleukin-17B) ELISA KitAlias: IL17B|CytokineZcyto7|cytokine-likeproteinZCYTO7|IL-17Binterleukin-17beta|IL20|IL-20interleukin-17B|interleukin17B|interleukin20|Interleukin-20|MGC138900|MGC138901|neuronalinterleukin-17relatedfactor|Neuronalinterleukin-17-relatedfactor|NIRF|ZCYTO7interleukin-20ELISAKitReactivity: Human

粘狀曲霉Human TLN1(Talin-1) ELISA KitAlias: TLN1(Talin-1)|KIAA1027|ILWEQ|KIAA1027|talin1|talin-1|TLNELISAKitReactivity: Human