實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個；
4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號
OVCA433細胞
詳見說明書
FS-X5397
產(chǎn)品名稱：卵巢癌細胞
培養(yǎng)基：1640
狀態(tài)：貼壁
公司細胞現(xiàn)貨供應，質量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
頭花蓼（標準品）英文名稱： Adenine hydrochlorideFas相互作用蛋白激酶3抗體包裝25g
透骨香（標準品）英文名稱： Inosine人類皰疹病8抗體包裝5g
土貝母苷英文名稱： Inosine磷酸化熱休克蛋白27抗體包裝25g
土貝母苷（標準品）英文名稱： 5'-AMP-Na2人類皰疹病8抗體包裝5g
土貝母苷乙英文名稱： 5'-AMP-Na2人類皰疹病8抗體包裝25g
土鱉蟲(地鱉)（標準品）英文名稱： 5-Bromo-2-deoxyuridine雌下調基因1蛋白抗體包裝5g
土鱉蟲（冀地鱉）（標準品）英文名稱： Cytidine轉錄因子HEY2蛋白抗體包裝1g
土大黃（標準品）英文名稱： Cytidine肺癌相關蛋白Y抗體包裝250mg
土大黃苷(標準品)英文名稱： 2'-Deoxyadenosine 5'-triphosphate disodium salt心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白1抗體包裝5g
土茯苓（標準品）英文名稱： 2'-Deoxyguanosine 5'-triphosphate trisodium salt 己糖激酶2抗體包裝100g
土槿皮（標準品）英文名稱： 2'-Deoxycytidine 5'-triphosphate disodium salt 熱休克蛋白90α/HSP90 α抗體包裝25g
土荊芥（標準品）英文名稱： 2'-deoxythymidine-5'-triphosphate (dTTP),3sodium salt, dihydrate血紅蛋白β抗體包裝5g
土荊皮(松)（標準品）英文名稱： 2'-Deoxyuridine透明質酸結合蛋白2抗體包裝100mg
土荊皮酸(標準品)英文名稱： Thymidine 透明質酸及粘蛋白2抗體包裝1g
Human MEFV(Pyrin) ELISA KitAlias: MEFV|MEF|MarenostrinELISAKitReactivity: Human
高盧蜜環(huán)菌Human UCP1(Mitochondrial brown fat uncoupling protein 1) ELISA KitAlias: UCP1(Mitochondrialbrownfatuncouplingprotein1)|Solutecarrierfamily25member7|Thermogenin|UCP1|UCP|uncouplingprotein1(mitochondrial|protoncarrier)|Thermogenin|SLC25A7mitochondrialbrownfatuncouplingprotein1ELISAKitReactivity: Human
球孢白僵菌Human UCP2(Mitochondrial uncoupling protein 2) ELISA KitAlias: UCP2(Mitochondrialuncouplingprotein2)|UCPH|uncouplingprotein2|Solutecarrierfamily25member8|uncouplingprotein2(mitochondrial|protoncarrier)ELISAKitReactivity: Human
發(fā)酵成對桿菌Human COQ10B(Coenzyme Q-binding protein COQ10 homolog B, mitochondrial) ELISA KitAlias: Coq10bELISAKitReactivity: Human
節(jié)桿菌Human LRP1(Prolow-density lipoprotein receptor-related protein 1) ELISA KitAlias: LRP1(Prolow-densitylipoproteinreceptor-relatedprotein1)|LRP-1|Alpha-2-macroglobulinreceptor|A2MR|ApolipoproteinEreceptor|APOER|CD91ELISAKitReactivity: Human
睪丸酮叢毛單胞菌Human LRP1(Prolow-density lipoprotein receptor-related protein 1) ELISA KitAlias: LRP1(Prolow-densitylipoproteinreceptor-relatedprotein1)|LRP-1|Alpha-2-macroglobulinreceptor|A2MR|ApolipoproteinEreceptor|APOER|CD91ELISAKitReactivity: Human
香氣紅冬孢鎖擲孢酵母Human MEFV(Pyrin) ELISA KitAlias: MEFV|MEF|MarenostrinELISAKitReactivity: Human
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、50ml離心筒2個
來源：卵巢癌；女性
酮麝香(標準品)英文名稱： Guanine SulfateFas相互作用蛋白激酶2抗體包裝5g
OVCA433細胞鹽古桿菌Human ADAMTS5(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 5) ELISA KitAlias: ADAMTS5(Adisintegrinandmetalloproteinasewiththrombospondinmotifs5)|ADAMTS11|ADMP-2|Aggrecanase2|Adisintegrinandmetalloproteinasewiththrombospondinmotifs11|adisintegrin-likeandmetalloprotease(reprolysintype)withthrombospondintype1motif|5(aggrecanase-2)|ADAMmetallopeptidasewiththrombospondintype1motif|5|ADAM-TS11|ADAM-TS5|ADAMTS-11|ADAM-TS5|ADAMTS-5|ADMP2|ADMP-2Adisintegrinandmetalloproteinasewiththrombospondinmotifs5|Aggrecanase-2|aggrecanase-2|disintegrin-likeandmetalloproteasewiththrombospondintype1motifELISAKitReactivity: Human
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：