
公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號
SR-786細(xì)胞
詳見說明書
FS-X5363
產(chǎn)品名稱:間變性大細(xì)胞**瘤細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):懸浮
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
4、培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
馬兜鈴酸C英文名稱: Tetrabutylammonium iodide磷酸化葡萄糖合成酶1抗體包裝250mg
馬兜鈴酸D英文名稱: Trioctylamine糖原蛋白1包裝1g
馬兜鈴酸II英文名稱: Sodium oxalate solution生長因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)接頭蛋白抗體包裝5g
馬蘭草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Congo red生長因子受體結(jié)合蛋白14抗體包裝100g
馬尿泡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Decanoic acidHBeAg結(jié)合蛋白4/甘油激酶抗體包裝25g
馬錢苷;馬錢子苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl linolelaidate甘酸-N-?;D(zhuǎn)移酶樣2抗體包裝5g
馬錢苷酸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl myristate磷脂酰基蛋白聚糖2抗體包裝100g
馬錢子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl palmitate氧化還原酶GlyR1/核蛋白60抗體包裝25g
螞蟻(棕褐蟻)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl linolenate神經(jīng)鞘脂激活蛋白3抗體包裝25g
買麻藤(小葉買麻藤)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl undecanoate甘露糖脫酶GMDS抗體包裝5g
麥冬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl nonadecanoate糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體包裝25g
麥冬苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-...英文名稱: Malonate糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2抗體包裝5g
麥冬內(nèi)酯A英文名稱: D-(?)-Isoascorbic acid膠漿成熟因子γ/GMF-γ抗體包裝1g
麥冬皂苷D英文名稱: Linoleic acid谷氨酰轉(zhuǎn)移酶GMPS抗體包裝100g
麥冬皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Leucocrystal VioletGDP甘露糖焦磷酸化酶B抗體包裝25g
釀酒酵母Human PDX1(Pancreas/duodenum homeobox protein 1) ELISA KitAlias: PDX1|IDX1|IPF1|Glucose-sensitivefactor|IDX-1GSF|Insulinpromoterfactor1|insulinpromoterfactor1|homeodomaintranscriptionfactor|Insulinupstreamfactor1|IPF1pancreas|duodenumhomeoboxprotein1|Islet|duodenumhomeobox-1|MODY4IUF1|pancreaticandduodenalhomeobox1|pancreatic-duodenalhomeoboxfactor1|PDX-1IPF-1|somatostatintranscriptionfactor1|Somatostatin-transactivatingfactor1|STF-1IUF-1ELISAKitReactivity: Human
阿爾通山堿線菌Human UBE3A(Ubiquitin-protein ligase E3A) ELISA KitAlias: UBE3A|ANCR|EPVE6AP|HPVE6A|ANCREPVE6AP|AS|CTCLtumorantigense37-2|E6AP|E6-AP|E6APubiquitin-proteinligase|HPVE6A|HumanpapillomavirusE6-associatedprotein|HumanpapillomavirusE6-associatedprotein|Oncogenicprotein-associatedproteinE6-AP|RenalcarcinomaantigenNY-REN-54|ubiquitinproteinligaseE3A|ubiquitin-proteinligaseE3AELISAKitReactivity: Human
發(fā)根土壤桿菌Human ENTPD1(Ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 1) ELISA KitAlias: ENTPD1|ADPase|ATP-diphosphatase|CD39|NTPD1|ATPDase|CD39antigen|ecto-apyrase|Ecto-apyrase|Ecto-ATPdiphosphohydrolase1|Ecto-ATPase1|Ecto-ATPDase1|ectonucleosidetriphosphatediphosphohydrolase1|FLJ40921|FLJ40959|Lymphoidcellactivationantigen|NTPDase1|NTPDase-1ELISAKitReactivity: Human
芽孢桿菌屬Human IFITM10(Interferon-induced transmembrane protein 10) ELISA KitAlias: IFITM10|DispaninsubfamilyAmember3ELISAKitReactivity: Human
矩圓黑盤孢Human DSG3(Desmoglein-3) ELISA KitAlias: DSG3|CDHF6|DKFZp686P23184|PVA|130kDapemphigusvulgarisantigen(PVA)|Cadherinfamilymember6|Cadherinfamilymember6|CDHF6130-kDpemphigusvulgarisantigen|desmoglein3|desmoglein3(pemphigusvulgarisantigen)|desmoglein-3|DKFZp686P23184|130kDapemphigusvulgarisantigen|pemphigusvulgarisantigenELISAKitReactivity: Human
假單胞菌Human PRKCE(Protein kinase C epsilon type) ELISA KitAlias: PKCε(ProteinKinaseCEpsilon)|PRKCE|PKCE|nPKC-epsilon|MGC125656|PKCEMGC125657|proteinkinaseCepsilontype|proteinkinaseC|epsilonELISAKitReactivity: Human
海水鹽單胞菌Human C9orf140(Protein C9orf140) ELISA KitAlias: C9orf140|TS|MDEP|Tumorspecificityandmitosisphase-dependentexpressionprotein|p42.3ELISAKitReactivity: Human
來源:間變性大細(xì)胞瘤;男性
實驗材料:
3、50ml離心筒2個
SR-786細(xì)胞外皮毛霉Human CHIA(Acidic mammalian chitinase) ELISA KitAlias: CHIA|Lung-specificproteinTSA1902|AMCaseELISAKitReactivity: Human