實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

產(chǎn)品名稱：滑膜肉瘤細胞
生長特性：貼壁生長

特征特性：1974年A.Leibovitz從theScottandWhiteClinic,Temple,Texas的一位25歲白人女性的纖維肉瘤手術切片中建立了SW982細胞株。病理組織學評價認為是與脂肪肉瘤一致的未分化惡性腫瘤。1982年１月ATCC收到１支傳代至4代的凍存管。在本庫通過支原體檢測。在本庫通過STR檢測。

培養(yǎng)條件：1640+10%FBS

1:2傳代

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凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
肺耐藥蛋白(LRP)elisa檢測試劑盒英文名稱：LRP ELISA Kit，英文縮寫：LRP，產(chǎn)品別名：肺耐藥蛋白(LRP)ELISA檢測試劑盒，肺耐藥蛋白(LRP)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

低氧誘導因子3α(HIF-3α)elisa檢測試劑盒英文名稱：HIF-3α ELISA Kit，英文縮寫：HIF-3α，產(chǎn)品別名：低氧誘導因子3α(HIF-3α)ELISA檢測試劑盒，低氧誘導因子3α(HIF-3α)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)elisa檢測試劑盒英文名稱：PARP ELISA Kit，英文縮寫：PARP，產(chǎn)品別名：多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)ELISA檢測試劑盒，多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

蛋白ATP1B4(ATP1B4)elisa檢測試劑盒英文名稱：ATP1B4 ELISA Kit，英文縮寫：ATP1B4，產(chǎn)品別名：蛋白ATP1B4(ATP1B4)ELISA檢測試劑盒，蛋白ATP1B4(ATP1B4)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

促胰液素(secretin)elisa檢測試劑盒英文名稱：secretin ELISA Kit，英文縮寫：secretin，產(chǎn)品別名：促胰液素(secretin)ELISA檢測試劑盒，促胰液素(secretin)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

巢蛋白1(NID1)elisa檢測試劑盒英文名稱：NID1 ELISA Kit，英文縮寫：NID1，產(chǎn)品別名：巢蛋白1(NID1)ELISA檢測試劑盒，巢蛋白1(NID1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

補體3裂解產(chǎn)物(C3SP)elisa檢測試劑盒英文名稱：C3SP ELISA Kit，英文縮寫：C3SP，產(chǎn)品別名：補體3裂解產(chǎn)物(C3SP)ELISA檢測試劑盒，補體3裂解產(chǎn)物(C3SP)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)elisa檢測試劑盒英文名稱：cPLA2 ELISA Kit，英文縮寫：cPLA2，產(chǎn)品別名：胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA檢測試劑盒，胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

白介素2受體(IL-2R)elisa檢測試劑盒英文名稱：IL-2R ELISA Kit，英文縮寫：IL-2R，產(chǎn)品別名：白介素2受體(IL-2R)ELISA檢測試劑盒，白介素2受體(IL-2R)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

白介素10(IL-10)elisa檢測試劑盒英文名稱：IL-10 ELISA Kit，英文縮寫：IL-10，產(chǎn)品別名：白介素10(IL-10)ELISA檢測試劑盒，白介素10(IL-10)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

β葡糖苷酶(β-glucosidase)elisa檢測試劑盒英文名稱：β-glucosidase ELISA Kit，英文縮寫：β-glucosidase，產(chǎn)品別名：β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA檢測試劑盒，β葡糖苷酶(β-glucosidase)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。
SW982[SW-982,SW982]細胞Laminin alpha 5  層粘蛋白α5抗體規(guī)格 0.1ml

Laminin alpha 4  層粘蛋白α4抗體(Lamininα4)規(guī)格 0.2ml

Laminin alpha 4  層粘蛋白α4抗體(Lamininα4)規(guī)格 0.2ml

Laminin alpha 1  層粘蛋白α1抗體規(guī)格 0.1ml

Laminin 5  層粘連蛋白5(laminin γ2)抗體規(guī)格 0.2ml

Laminin 2 alpha  層粘蛋白α2抗體規(guī)格 0.2ml

Laminin 1+2  層粘連蛋白1+2抗體規(guī)格 0.1ml
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。