
產(chǎn)品名稱:胚肺成纖維細(xì)胞;IMR-90
特征特性:W.W.Nichols及其同事從一位16周女嬰的肺中取材,建立了人二倍體成纖維細(xì)胞株IMR-90。分裂潛能,病毒感受性和其它性質(zhì)都得到了充分研究,因而這株細(xì)胞可以作為WI-38或其它標(biāo)準(zhǔn)人肺細(xì)胞株的替代株。有報(bào)道稱這株細(xì)胞在表現(xiàn)出衰老前可倍增58次。
培養(yǎng)條件:MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalanCA-dSalts)胎牛血清,10%
1:2傳代
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號(hào)
人胚肺成纖維細(xì)胞;IMR-90
T25
FS-X4230
公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
載脂蛋白A5(apo-A5)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:apo-A5 ELISA Kit,英文縮寫:apo-A5,產(chǎn)品別名:載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA檢測(cè)試劑盒,載脂蛋白A5(apo-A5)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
胰島細(xì)胞抗原2抗體/蛋白酪氨酸磷酸酶抗體(IA-2A)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:IA-2A ELISA Kit,英文縮寫:IA-2A,產(chǎn)品別名:胰島細(xì)胞抗原2抗體/蛋白酪氨酸磷酸酶抗體(IA-2A)ELISA檢測(cè)試劑盒,胰島細(xì)胞抗原2抗體/蛋白酪氨酸磷酸酶抗體(IA-2A)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
抑肽酶(AP)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:AP ELISA Kit,英文縮寫:AP,產(chǎn)品別名:抑肽酶(AP)ELISA檢測(cè)試劑盒,抑肽酶(AP)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
氧還原蛋白過氧化物酶4(PRDX4)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:PRDX4 ELISA Kit,英文縮寫:PRDX4,產(chǎn)品別名:氧還原蛋白過氧化物酶4(PRDX4)ELISA檢測(cè)試劑盒,氧還原蛋白過氧化物酶4(PRDX4)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
血清淀粉樣蛋白P(SAP)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:SAP ELISA Kit,英文縮寫:SAP,產(chǎn)品別名:血清淀粉樣蛋白P(SAP)ELISA檢測(cè)試劑盒,血清淀粉樣蛋白P(SAP)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit,英文縮寫:VEGFR-1/Flt1,產(chǎn)品別名:血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA檢測(cè)試劑盒,血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
胸腺基質(zhì)細(xì)胞**素(TSLP)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:TSLP ELISA Kit,英文縮寫:TSLP,產(chǎn)品別名:胸腺基質(zhì)細(xì)胞**素(TSLP)ELISA檢測(cè)試劑盒,胸腺基質(zhì)細(xì)胞**素(TSLP)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:ABCA1 ELISA Kit,英文縮寫:ABCA1,產(chǎn)品別名:腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)ELISA檢測(cè)試劑盒,腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
細(xì)胞色素b561(cytb561)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:cytb561 ELISA Kit,英文縮寫:cytb561,產(chǎn)品別名:細(xì)胞色素b561(cytb561)ELISA檢測(cè)試劑盒,細(xì)胞色素b561(cytb561)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
胃動(dòng)素(MTL)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:MTL ELISA Kit,英文縮寫:MTL,產(chǎn)品別名:胃動(dòng)素(MTL)ELISA檢測(cè)試劑盒,胃動(dòng)素(MTL)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:DNase-Ⅰ ELISA Kit,英文縮寫:DNase-Ⅰ,產(chǎn)品別名:脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA檢測(cè)試劑盒,脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
MAP3K8/TPL2 絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體規(guī)格 0.2ml
MAP3K7IP3 NFKB激活蛋白1抗體規(guī)格 0.1ml
MAP3K7IP1/TAB1 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化激酶結(jié)合蛋白1抗體規(guī)格 0.1ml
MAP3K5/ASK1/MEKK5 細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體規(guī)格 0.1ml
MAP3K2/MEKK2 絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體規(guī)格 0.1ml
MAP3K14/NFkB Inducing Kinase NIK 絲裂原活化蛋白激酶3K14抗體規(guī)格 0.2ml
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
實(shí)驗(yàn)材料:
3、50ml離心筒2個(gè)
人胚肺成纖維細(xì)胞;IMR-90MAP3K9 絲裂原活化蛋白激酶3K9抗體規(guī)格 0.2ml