
產(chǎn)品名稱:
培養(yǎng)條件:DMEM+10%FBS
1:2傳代
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號(hào)
tpCS-1細(xì)胞
T25
FS-X4216
公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白E(hnRNP E)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:hnRNP E ELISA Kit,英文縮寫:hnRNP E,產(chǎn)品別名:異質(zhì)性胞核核糖核蛋白E(hnRNP E)ELISA檢測(cè)試劑盒,異質(zhì)性胞核核糖核蛋白E(hnRNP E)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
血小板源性生長(zhǎng)因子D(PDGF-D)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:PDGF-D ELISA Kit,英文縮寫:PDGF-D,產(chǎn)品別名:血小板源性生長(zhǎng)因子D(PDGF-D)ELISA檢測(cè)試劑盒,血小板源性生長(zhǎng)因子D(PDGF-D)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:IGFBP-1 ELISA Kit,英文縮寫:IGFBP-1,產(chǎn)品別名:胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA檢測(cè)試劑盒,胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
血漿抗凝蛋白S(PS)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:PS ELISA Kit,英文縮寫:PS,產(chǎn)品別名:血漿抗凝蛋白S(PS)ELISA檢測(cè)試劑盒,血漿抗凝蛋白S(PS)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit,英文縮寫:VEGFR-1/Flt1,產(chǎn)品別名:血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA檢測(cè)試劑盒,血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子6(STAT6)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:STAT6 ELISA Kit,英文縮寫:STAT6,產(chǎn)品別名:信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子6(STAT6)ELISA檢測(cè)試劑盒,信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子6(STAT6)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
纖維介素蛋白(fgl2)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:fgl2 ELISA Kit,英文縮寫:fgl2,產(chǎn)品別名:纖維介素蛋白(fgl2)ELISA檢測(cè)試劑盒,纖維介素蛋白(fgl2)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
細(xì)胞角蛋白18-M30(CK 18-M30)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:CK 18-M30 ELISA Kit,英文縮寫:CK 18-M30,產(chǎn)品別名:細(xì)胞角蛋白18-M30(CK 18-M30)ELISA檢測(cè)試劑盒,細(xì)胞角蛋白18-M30(CK 18-M30)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
維生素K依賴蛋白Z(PROZ)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:PROZ ELISA Kit,英文縮寫:PROZ,產(chǎn)品別名:維生素K依賴蛋白Z(PROZ)ELISA檢測(cè)試劑盒,維生素K依賴蛋白Z(PROZ)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
突觸回蛋白2(SYNJ2)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:SYNJ2 ELISA Kit,英文縮寫:SYNJ2,產(chǎn)品別名:突觸回蛋白2(SYNJ2)ELISA檢測(cè)試劑盒,突觸回蛋白2(SYNJ2)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
糖化蛋白(GSP)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:GSP ELISA Kit,英文縮寫:GSP,產(chǎn)品別名:糖化蛋白(GSP)ELISA檢測(cè)試劑盒,糖化蛋白(GSP)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
MeCP2 甲基化CpG結(jié)合蛋白2抗體規(guī)格 0.1ml
Measles virus fusion protein 麻疹病融合蛋白抗體規(guī)格 0.2ml
ME1 胞漿蘋果酸酶1抗體規(guī)格 0.2ml
MDR1/p-GP/CD243 (N-terminus) 多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體規(guī)格 0.1ml
MDR1/p-GP/CD243 (C-terminus) 多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體(C端)規(guī)格 0.1ml
MDMX MDM2樣P53蛋白結(jié)合抗體規(guī)格 0.2ml
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
實(shí)驗(yàn)材料:
3、50ml離心筒2個(gè)
tpCS-1細(xì)胞MEF2A 肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體規(guī)格 0.1ml