公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

產(chǎn)品名稱：肝癌細(xì)胞；SUN-449
形態(tài)特性：上皮樣

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

培養(yǎng)條件：DMEM(高糖）+10%FBS

傳代方法：1：2傳代
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 

1,4-丁二二縮水甘油 60%Human Salusin Alpha ELISA Kit  人Salusin-α兔氨端前腦鈉素(NT-proBNP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

硫 98%(限制品)human Insulin receptor substrate 2,IRS-2 ELISA Kit  人胰島素受體底物2兔小表皮粘蛋白(SBEM)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

N-（3-溴）鄰二酰亞 98%Human transthyretin,TTR ELISA Kit  人轉(zhuǎn)狀腺素蛋白兔干擾素誘導(dǎo)Tα亞族趨化因子 (I-TAC)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氫鋇 98%Human advanced oxidation protein products,AOPP ELISA Kit  人晚期氧化蛋白產(chǎn)物兔普通急性白血病抗原(CALLA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

5-溴尿嘧啶 99%Human islet amyloid polypeptide,IAPP ELISA Kit  人胰島淀粉樣多肽兔成纖維生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(FGFBP1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

降烯 99%Human glycosylated serum protein,GSP ELISA Kit  人糖化蛋白兔脂酰肌蛋白聚糖2(GPC2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

仲丁 standard for GC, ≥99.8% (GC)Human Glycated Albumin,GA ELISA Kit  人糖化白蛋白兔C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族2成員C(CLEC2C)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

仲丁 99.5%,無(wú)水級(jí)Human Thyroxine-Binding Globulin Assay,TBG ELISA Kit  人狀腺結(jié)合球蛋白兔脂爬行酶2(PLSCR2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

3,4-并芘 96%Human advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit  人晚期糖化終末產(chǎn)物兔T特異性鳥(niǎo)苷三酶(Tgtp)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

3,4-并芘 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human C-Polypeptide,CP ELISA Kit  人C多肽兔白分化抗原28(CD28)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

3,4-并芘標(biāo)準(zhǔn)溶液 5.25μg/mL，體：Human Receptor for advanced glycation end products, RAGE/AGER ELISA Kit  人晚期糖化終末產(chǎn)物受體兔嗜中性粒防御素α1(DEFα1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

正丁 for HPLC，≥99.7% (GC) Human Glucagon,GC ELISA Kit  人胰高血糖素兔V型膠原α2(COL5α2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

 SPHuman Pancreatic Polypeptide,PP ELISA Kit  人胰多肽兔核糖體蛋白L10(RPL10)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

異硫丁酯 99%Human insulin autoantibodies,IAA ELISA Kit  人胰島素自身抗體兔TGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答因1(TIEG1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

二 98%（劇品）Human glutamic acid decarboxylase,GAD ELISA Kit  人谷氨脫羧酶兔白介素22(IL-22)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
SUN-449細(xì)胞接觸蛋白4Elisa試劑盒生物素標(biāo)記的兔抗人IgMNeurobeachin  蛋白激酶錨定蛋白抗體

CD166分子Elisa試劑盒辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的兔抗人IgMNeurexin 2  軸突蛋白2抗體

脫氫酶1家族成員Elisa試劑盒堿性酶（AP）標(biāo)記的兔抗人IgMNeurexin 1  軸突蛋白1(Neurexin 1α)抗體

幽門螺旋桿IgA抗體Elisa試劑盒膠體金標(biāo)記的兔抗人IgMNeuN  神經(jīng)元核抗原抗體

CD29分子Elisa試劑盒FITC標(biāo)記的兔抗人IgMNEU4  神經(jīng)氨酶4抗體

三結(jié)構(gòu)域包含蛋白72Elisa試劑盒Cy3標(biāo)記的兔抗人IgMNetrin G2  軸突生長(zhǎng)誘向因子G2抗體

可溶性糖蛋白ⅥElisa試劑盒Cy5標(biāo)記的兔抗人IgMNetrin G1 ligand  軸突生長(zhǎng)誘向因子G1配體抗體

CD147分子Elisa試劑盒Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgMNetrin 4  軸突生長(zhǎng)誘向因子4抗體

碳酐酶6Elisa試劑盒Cy7標(biāo)記的兔抗人IgMNETO1  腦低密度脂蛋白受體蛋白1抗體