產(chǎn)品名稱(chēng)：肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞；HuH-6
形態(tài)特性：上皮樣

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

特征特性：肝癌。據(jù)說(shuō)產(chǎn)球蛋白和甲胎蛋白。

培養(yǎng)條件：DMEM(高糖）+10%FBS

傳代方法：消化CQ-5分鐘。1:2。C-L7天長(zhǎng)滿。

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)；

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

二一溴 分析標(biāo)準(zhǔn)品，用于環(huán)境分析Human major histocompatibility complex I ,MHC I /HLA I ELISA Kit  人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi)兔嗜鉻蛋白B(CgB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

一溴二標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.930mg/ml，體：Human Anti-Thrombin III ,AT- III ELISA Kit  人抗凝血酶Ⅲ抗體兔載脂蛋白C1(ApoC1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

一溴二標(biāo)準(zhǔn)溶液455ug/ml,溶劑:Human thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit  人血栓前體蛋白兔I型前膠原羧端原肽(PICP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

二一溴 98%Human lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit   人功能相關(guān)抗原3兔蕈堿型膽堿受體M2(CHRM2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

1,2-二(二硅) 98%Human major histocompatibility complex III ,MHC III /HLA- III ELISA Kit  人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(lèi)兔表睪酮(ET)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

1，4-二（二硅烷） 97%Human major histocompatibility complex II ,MHC II /HLA- II ELISA Kit  人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(lèi)兔粘蛋白21(MUC21)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

1-丁-3-咪唑辛硫鹽 99%Human apoprotein A1,apo-A1 ELISA Kit  人載脂蛋白A1兔V-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病癌因同源物B (RELB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

Boc-L-脯氨 97%Human apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit  人載脂蛋白B100兔色素P450家族成員1B1(CYP1B1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

1-丁吡啶鹽鹽 98%Human leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit   人白血病抑制因子受體兔二氫硫辛脫氫酶(DLD)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

3,9-二(1, 1-二-2-羥乙)-2,4,8,10-氧代螺旋[5.5]十一烷 Human Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit   人球蛋白A兔脂酰絲氨(PS)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

(±)-3-羥-r-丁內(nèi)酯 96%Human Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit   人球蛋白G兔肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

1,4-并二噁烷 98%Human Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit   人球蛋白M兔雙調(diào)蛋白(AR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

酰酮 98%Human plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA Kit   人纖溶酶原激活物抑制因子1兔胎兒血紅蛋白(HBF)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

α-溴代鄰乙酮   95%Human plasminogen activator inhibitor,PAI ELISA Kit   人纖溶酶原激活物抑制因子兔促血管**素1(ANG1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

3,5-雙（三氟） 97%Human Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit   人血纖蛋白原降解產(chǎn)物兔S抗原(SAG)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
HuH-6細(xì)胞流行性腦脊髓膜炎病IgM抗體Elisa試劑盒Cy7標(biāo)記的兔抗馬IgGNFAT1/NFATc2  核因子活化T胞漿蛋白2抗體

Janus激酶2Elisa試劑盒PE標(biāo)記的兔抗馬IgGNfasc186   神經(jīng)束蛋白186抗體

分揀蛋白1Elisa試劑盒羅丹明標(biāo)記的兔抗人IgGNFAM1/CNAIP  NFAM1抗體

鳥(niǎo)苷環(huán)化酶Elisa試劑盒膠體金標(biāo)記的兔抗人IgGNF66/alpha Internexin  α-中連蛋白抗體

酰輔酶A合成酶長(zhǎng)鏈家族成員3Elisa試劑盒堿性酶（AP）標(biāo)記的兔抗人IgGNF2/Neurofibromin 2  2型神經(jīng)纖維瘤抗體

膠原Ⅳ型α1Elisa試劑盒PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgGNF1/Neurofibromin 1  1型神經(jīng)纖維瘤抗體

紅膜蛋白抗體Elisa試劑盒PE-Cy7標(biāo)記的兔抗人IgGNewcastle disease virus  雞新城疫疫苗（雞瘟4型混合?。┛贵w

連接黏附分子-AElisa試劑盒APC標(biāo)記的兔抗人IgGNeutrophil Elastase/ELANE  中性粒彈性蛋白酶ELANE抗體

四加半LIM域蛋白1Elisa試劑盒Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗人IgGNeurturin  神經(jīng)生長(zhǎng)因子抗體