實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

產(chǎn)品名稱：骨髓瘤細胞；OPM-2
生長特性：懸浮生長

培養(yǎng)條件：DMEM(高糖）+10%FBS(GIBCO)

傳代方法：1：2傳代

公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
氧化金 金含量≥88.6 %LAC/LA(Human lupus anticoagulant) ELISA Kit  人狼瘡抗凝抗體兔肝配蛋白A1 (EFNA1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

3-乙酰-2,5-二噻吩 99%Human soluble fibrin monomer complex,SFMC ELISA Kit  人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物兔金屬硫蛋白3 (MT3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2-乙酰-5-呋喃 98%Human sreum albumin,HSA ELISA Kit  人血清白蛋白兔雌受體β(ERβ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2-乙酰-5-噻吩 98%Human 2,3-dinor thromboxane B2,2,3-dinor-TXB2 ELISA Kit  人2,3Dinor血栓烷B2兔唾液(SA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

3-乙酰芐 98%Human 11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 ELISA Kit  人11去氫血栓烷B2兔抗性酶(ACP5)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

4-氮雜并咪唑 99%Human thrombomodulin,TM ELISA Kit   人血栓調(diào)節(jié)蛋白兔鳥苷環(huán)化酶激活因子2A(GUCA2A)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

1-氨-2-萘酚鹽鹽 97%Human Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI ELISA Kit  人纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物兔單核趨化蛋白3(MCP-3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

1-氨-2-萘酚鹽鹽 工業(yè)級，90%Human plaet membrane glycoprotein II b III a,GP- II b III a ELISA Kit  人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa兔脂酰肌蛋白聚糖4(GPC4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2-氨-4--6-嘧啶 98%Human thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit  人血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1兔可溶性糖蛋白130(sgp130)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2-氨-5-噻唑鹽鹽 97%Human alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit  人血漿α顆粒膜蛋白兔硫乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

1-(2-氨乙) 98%Human terminal complement complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit  人末端補體復(fù)合物C5b-9兔P62抗體(AP62A)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

5-氨-2-吡啶 97%Human Complement 4,C4 ELISA Kit   人補體蛋白4兔巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

5-氨吲唑 98%Human Complement 3,C3 ELISA Kit  人補體蛋白3兔肽聚糖識別蛋白S(PGRP-S)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

5-氨-4,6-二嘧啶 98%Human coagulation factor II ,F II ELISA Kit  人凝血因子Ⅱ兔色素上皮衍生因子(PEDF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

6-氨并噻唑 98+%Human leucocyte antigen B27,HLA-B27 ELISA Kit  人類白抗原B27兔失調(diào)癥蛋白質(zhì)2(ATXN2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
OPM-2細胞乙脫氫酶Elisa試劑盒Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗豚鼠IgMNF-κB p105/p50(Phospho-Ser373)  化核因子p50/k因結(jié)合核因子抗體

鹽皮質(zhì)Elisa試劑盒辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗馬IgGNFX1  核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白1抗體

膜聯(lián)蛋白ⅡElisa試劑盒生物素標(biāo)記的兔抗馬IgGNF-M/Neurofilament M  中分子量神經(jīng)絲蛋白抗體

血管內(nèi)皮鈣黏蛋白Elisa試劑盒APC標(biāo)記的兔抗馬IgGNF-L/Neurofilament L/Neurofilament 68  低分子量神經(jīng)絲蛋白抗體

細螺旋體病IgM 抗體Elisa試劑盒Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗馬IgGNFKBIB/IKB beta  核因子κB抑制蛋白β抗體

膽堿轉(zhuǎn)運體樣蛋白4Elisa試劑盒Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗馬IgGNFKBIA/IKB alpha  核因子κB抑制蛋白α抗體

膜聯(lián)蛋白XIElisa試劑盒Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗馬IgGNFKB p65  核因子/k因結(jié)合核因子抗體

細螺旋體病IgG抗體Elisa試劑盒Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗馬IgGNFKB p52/NFKB2  核因子/k因結(jié)合核因子 p52/p100抗體

卵泡抑素樣蛋白1Elisa試劑盒PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗馬IgGNFkB p105/p50  核因子p50/k因結(jié)合核因子抗體
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。