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產品名稱：肺成纖維細胞；HFL1
形態(tài)特性：成纖維細胞樣

生長特性：貼壁生長

特征特性：該細胞為穩(wěn)定二倍體細胞。

培養(yǎng)條件：F12K+10%FBS

傳代方法：消化CQ-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

偶氮 97%C1INH(Human Complement 1 inhibitor autoantibody) ELISA Kit  人補體1抑制物抗體兔纖蛋白原(FG)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

偶氮 分析標準品BF(Human factor B) ELISA Kit  人B因子兔脂氧素A4(LXA4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

吖啶酮 98%HLA-G(Human leukocyte antigen G) ELISA Kit  人類白抗原G兔腎損傷分子1(KIM-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

溴化乙酰膽堿 98%C3b(Human Complement fragment 3b) ELISA Kit  人補體片斷3b兔角蛋白18(CK-18/KRT18)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

二-2-氨乙酯 98%C4b(Human Complement fragment 4b) ELISA Kit  人補體片斷4b兔結構特異性識別蛋白1(SSRP1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

3-氨-4-羥 97%C4d(Human Complement fragment 4d) ELISA Kit  人補體片斷4d兔心臟肌球蛋白結合蛋白C(MYBPC3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

3-氨酰 98%C5b(Human Complement fragment 5b) ELISA Kit  人補體片斷5b兔胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP-2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

5-氨-1-戊 97%IgH(Human immunoglobulin heavy chain) ELISA Kit  人球蛋白重鏈兔大腸癌專一抗原3(CCSA-3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

松香 75%IgHV(Human immunoglobulin heavy chain variable region) ELISA Kit  人球蛋白重鏈可變區(qū)兔協(xié)同激分子受體(CMR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

4-乙酰氨 99%poly-IgR(polyimmunoglobulinreceptor) ELISA Kit  人多球蛋白受體兔胎球蛋白A(FETUA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

5-氨戊 97%Hb-AGE(Human hemoglobin-advanced glycosylation end products) ELISA Kit  人血紅蛋白晚期糖化終末產物兔脂酶A2受體1(PLA2R1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

硫 AR,99.0%mIgA(Human membrane IgA) ELISA Kit  人表面膜球蛋白A兔Apelin蛋白(APLN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

蒽 96%Ig-j(Human immunoglubin joining chain) ELISA Kit  人球蛋白j鏈兔凝血因子Ⅶ(F7)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

阿脲，一水  98%HB- Beta(Human Beta-subunits of hemoglobin) ELISA Kit  人血紅蛋白β亞兔彈性蛋白酶4(ELA4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

乙縮 Standard for GC，>99%（GC)SIgA(Human secretory immunoglobulin A) ELISA Kit  人型球蛋白A兔Corin蛋白(CRN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
HFL1細胞5-羥色受體1B抗體Elisa試劑盒PE-Cy5.5標記的兔抗豚鼠IgGNIFK  KI67相互作用蛋白抗體

胃泌素17抗體Elisa試劑盒PE-Cy7標記的兔抗豚鼠IgGNidogen 2  巢蛋白NID2抗體

含半胱氨豐富蛋白LCCL域蛋白2Elisa試劑盒羅丹明標記的兔抗豚鼠IgGNicastrin  老年性癡呆蛋白APH2抗體

狀瘤病抗體18型Elisa試劑盒Cy5.5標記的兔抗豚鼠IgMNHLRC3  非霍奇金瘤重復蛋白3抗體

蓖麻素Elisa試劑盒Cy7標記的兔抗豚鼠IgMNHLRC2  非霍奇金瘤重復蛋白2抗體

硬皮病Elisa試劑盒PE標記的兔抗豚鼠IgMNHLRC1  肌痙攣性癲癇病相關EPM2蛋白抗體

硬皮病Elisa試劑盒羅丹明標記的兔抗豚鼠IgMNHEDC2  線粒體鈉/氫交換蛋白質2抗體

抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體Elisa試劑盒FITC標記的兔抗豚鼠IgMNHE1/APNH1  鈉氫通道蛋白抗體

載脂蛋白DElisa試劑盒堿性酶（AP）標記的兔抗豚鼠IgMNGX6  鼻咽癌相關因6抗體