公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號
A549細胞
T25
FS-X3247
產(chǎn)品名稱：肺癌細胞；A549
生長特性：貼壁生長
特征特性：該細胞系是1972年由GiardDJ通過肺癌組織移植培養(yǎng)建系的，源自一位58歲的白人男性。A549能通過胞苷二磷脂酰膽堿途徑合成富含不飽和脂肪酸的卵磷脂；角蛋白陽性。
培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS
傳代方法：消化CQ-5分鐘，1:2,3天內(nèi)可長滿
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個；
4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
三氟磺 98%AlphaNAG (Human AlphaN-acetylglucosaminidase) ELISA Kit 人αN已酰氨葡糖苷酶兔腫瘤壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
三氧膦 98%Alpha2-PI (Human Alpha2-plasmin inhititor) ELISA Kit 人α2纖溶酶抑制物兔谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶κ1(GSTκ1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
三 97%人高香草(HVA) ELISA Kit 人高香草兔11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
三氟磺酐 98%人煙酰腺嘌呤二核苷(NADPH) ELISA Kit 人煙酰腺嘌呤二核苷兔過氧化還原酶1(PRDX1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
四丁溴化 98%CNR-1(Human cadherln-related neuronal receptor1) ELISA Kit 人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1兔胱抑素C(Cys-C)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
2-硫代 98%ATM(Human Ataxia angiectasia mutated) ELISA Kit 人擴張性共濟失調(diào)突變因兔間隙連接蛋白31(CX31)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
地塞米松鈉 98%AhR(Human aryl hydrocarbon receptor) ELISA Kit 人芳香烴受體兔粒集落激因子受體(GCSFR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
四化硅 AR,99.50%SMAF(Human Specifie Macrophage Arming Paetot) ELISA Kit 人特異性巨噬武裝因子兔白介素5(IL-5)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
四化硅 99.9999%MF/MPF(Human maturation promoting factor) ELISA Kit 人促有絲分裂因子兔蛋白酪氨酶受體O(PTPRO)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
四化硅 99.999999%ATF-1(Human activating transcription factor-1) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1兔突觸體相關(guān)蛋白25(SAP25)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
四化硅 99.9999999%HAMA(Human antimous antibody) ELISA 人抗鼠抗體兔生長因子受體結(jié)合蛋白14(Grb14)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
化亞銅 CPVGCC(Human voltage-gated calcium channel) ELISA Kit 人鈣離子通道抗體兔抗鈣調(diào)素特異抗體(CAM-Ab)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
胞苷-5'-單二鈉鹽 99%BrdU(Human Bromodeoxyuridine) ELISA Kit 人溴脫氧核苷尿嘧啶兔性別決定區(qū)Y框蛋白18(SOX18)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
間酰 99%FSP(Human Fibroblast surface protein) ELISA Kit 人纖維母表面抗原兔白共同抗原(LCA/CD45)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
2’-脫氧鳥苷 99%SLPI(Human secretory leukocyte protease inhibitor) ELISA Kit 人性白蛋白酶抑制因子兔集聚蛋白(AGRN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
精氨脫亞酶Elisa試劑盒生物素標記的兔抗雞IgMNPY2R 神經(jīng)肽Y受體2抗體
色氨酰tRNA合成酶Elisa試劑盒Alexa Fluor 350標記的兔抗雞IgMNPY1R 神經(jīng)肽Y1受體抗體
抗胰蛋白酶抗體Elisa試劑盒Alexa Fluor 488標記的兔抗雞IgMNPY/Neuropeptide Y 神經(jīng)肽Y抗體
抗素前體Elisa試劑盒Alexa Fluor 555標記的兔抗雞IgMNPTX2 神經(jīng)穿透素2抗體
白分化抗原4Elisa試劑盒Alexa Fluor 647標記的兔抗雞IgMNPTX1 神經(jīng)正五聚體1抗體
過氧化還原酶1Elisa試劑盒PE-Cy5.5標記的兔抗雞IgMNPRC/Natriuretic Peptide Receptor C 利鈉肽受體C抗體
粒蛋白1Elisa試劑盒PE-Cy7標記的兔抗雞IgMNPRB 利鈉肽受體B抗體
器支原體IgG抗體Elisa試劑盒堿性酶（AP）標記的兔抗雞IgMNPR2L/G21 protein G21蛋白質(zhì)抗體
形態(tài)特性：上皮樣；多角形
實驗材料：
3、50ml離心筒2個
A549細胞眼小畸形關(guān)聯(lián)轉(zhuǎn)錄因子Elisa試劑盒Alexa Fluor 647標記的兔抗雞IgGNQO1 醌氧化還原酶抗體