公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱：高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞；95-D
形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：貼壁生長

特征特性：這是一株高轉(zhuǎn)移肺癌。

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法：消化CQ-5分鐘，1:2,3天內(nèi)可長滿
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

氧化釹 40nm 球形，99.5%MYO/MB(Human Myoglobin) ELISA Kit  人肌紅蛋白兔促腎上皮質(zhì)釋放(CRH)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化鐠 99.9% metals basiscTn- I (Human cardiac troponin I ) ELISA Kit  人心肌肌鈣蛋白Ⅰ兔凋亡相關(guān)因子配體(FASL/TNFSF6)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化鐠 50nm 球形，99.5%Tie1(Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 1) ELISA kit  人血管**素受體/含球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨激酶1兔質(zhì)金屬蛋白酶原13 (Pro-MMP-13)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化釤 99.9% metals basisANG-2(Human Angiopoietin 2) ELISA Kit  人血管**素2兔胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化釤 99.99% metals basisANG-1(Human Angiopoietin 1) ELISA Kit  人血管**素1兔Bκ 輕肽因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(Nfkbie)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化釤 40nm 球形，99.5%ANG(Human Angiogenin) ELISA Kit  人血管生長素兔蛋白二硫化物異構(gòu)酶A5(PDIA5)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化鈧(Ⅲ) 99.99% (REO) ANG- II (Human angiotension II ) ELISA Kit  人血管緊張素Ⅱ兔髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

氧化鈧(Ⅲ) 99.999% (REO)Park2(Human Parkinson disease 2 parkin) ELISA Kit  人帕金森氏病2Parkin兔中性粒明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化鋱 99.9% metals basisVCL(Human vinculin) ELISA Kit  人紐蛋白兔蛋白酶激活受體3(PAR3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化銩 99.99% metals basisNtn4(Human Netrin-4) ELISA Kit  人軸突生長誘向因子4兔血小板反應(yīng)蛋白2(TSP-2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化釔 99.99% metals basisNtn1(Human Netrin-1) ELISA Kit  人軸突生長誘向因子1兔環(huán)腺苷二核糖水解酶(cADPRH/CD38)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化釔 40nm 球形，99.5%REG-4(Human regenerating gene IV ) ELISA Kit  人再生因蛋白IV兔糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

氧化釔 99.999% metals basisVS(Human versican/PG-M/PG-350) ELISA kit  人多功能蛋白聚糖兔43KDa Tar DNA結(jié)合蛋白(TDP43)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化釔 99.9% metals basisNfkbie(Human nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells inhibitor epsilon) KLISA Kit  人Bκ 輕肽因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε兔腫瘤標(biāo)志物CA724(CA724)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化鐿 99.9% metals basisADAMTS4(Human ADAM metallopeptidase with thrombospondin type 1 motif4) ELISA Kit  人ADAM金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1元4兔三肽肽酶I(TPP1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
95-D細(xì)胞二羥二十碳三烯Elisa試劑盒Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgGNUDC  核分離因C蛋白抗體

肌脂酶Elisa試劑盒Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgGNucleostemin  核干因子抗體(鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白3)

環(huán)氧化合物水解酶2Elisa試劑盒PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgGNucleoprotein/NP  A型流感病核蛋白抗體

肝結(jié)節(jié)有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽8Elisa試劑盒PE-Cy7標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgGNucleoprotein TPR  核蛋白易位啟動(dòng)子區(qū)域TPR抗體

ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白C3Elisa試劑盒生物素標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgGNucleoporin p62  核孔糖蛋白P62抗體

NADPH氧化酶2Elisa試劑盒堿性酶（AP）標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgGNucleophosmin  核仁蛋白抗體

Eya1蛋白Elisa試劑盒FITC標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgGNucleolin/C23  核仁蛋白C23抗體

皰疹病-8型感染Elisa試劑盒膠體金標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgGNucleolar protein 3/Apoptosis repressor with CARD  核仁蛋白3抗體

多瘤病Elisa試劑盒羅丹明標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgGNuclear Matrix Protein p84/NMP84   核質(zhì)p84蛋白抗體