公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

形態(tài)特性：上皮樣

生長(zhǎng)特性：貼壁/懸浮生長(zhǎng)，混合

特征特性：該細(xì)胞是1982年由CarneyD和GazdarAF等從一位小細(xì)胞肺癌患者的胸腔積液中建立的。細(xì)胞的原始形態(tài)并不具有小細(xì)胞肺癌特征。這個(gè)細(xì)胞株是小細(xì)胞肺癌的生化和形態(tài)學(xué)上的變種，表達(dá)神經(jīng)元特有的烯醇酶和腦型肌酸激酶同工酶；多巴脫羧酶、蠶素、抗**、催產(chǎn)素或胃泌釋放肽未達(dá)到可檢測(cè)水平。與正常細(xì)胞相比，該細(xì)胞CS-mycDNA序列擴(kuò)增約20倍，RNA增加15倍。初傳代培養(yǎng)基用含有5%FBS的RPMI1640，另外添加10nM氫化可的松、
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 

碳化鋯 99%,1μmhs-CRP(Human high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit  人超敏C反應(yīng)蛋白兔睪酮受體(TR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化鈰 20nm 球形，99.5%Tn- I (Human Troponin I ) ELISA Kit  人肌鈣蛋白Ⅰ兔肌營(yíng)養(yǎng)**蛋白(DMD)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化鏑 ≥99.99% metals basisSAA(Human Serum amyloid A) ELISA Kit  人血清淀粉樣蛋白A兔I型膠原交聯(lián)氨端肽(NTXI)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

氧化鏑 40nm 球形，99.5%Hsp-60(Human Heat Shock Protein 60) ELISA Kit  人熱休克蛋白60兔B活化因子 (BAFF/CD257/TNFSF13B)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化鉺 99.9% metals basisHSP gp96(Human Heat Shock Protein glycoprotein 96) ELISA Kit  人熱休克蛋白糖蛋白96兔黑素轉(zhuǎn)鐵蛋白(MFI2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化銪 99.99% metals basisCT-1(Human cardiotrophln 1) ELISA Kit  人心肌營(yíng)養(yǎng)素1兔粘附蛋白相互作用蛋白(CYTIP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

氧化釓 99.9% metals basisCP/CER(Human Ceruloplasmin) ELISA Kit  人銅藍(lán)蛋白兔糖盞蛋白(GC)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化釓 99.99% metals basisHSP-90(Human Heat Shock Protein 90) ELISA Kit  人熱休克蛋白90兔顆粒酶B(GzmB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化鈥 99.99% metals basisHSP-70(Human Heat Shock Protein 70) ELISA Kit  人熱休克蛋白70兔核孔蛋白153kda(NUP153)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

納米氧化鈥 99.9% metals basis,<100 nm particle size (BET)HSP-40(Human Heat Shock Protein 40) ELISA Kit  人熱休克蛋白40兔輔肌動(dòng)蛋白α3(ACTN3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化鑭 99.99% metals basisHSP-20(Human Heat Shock Protein 20) ELISA Kit  人熱休克蛋白20兔彈性蛋白酶2B(ELA2B)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

氧化鑭 99.999% metals basisMYS(Human Myosin) ELISA Kit  人肌球蛋白兔前膠原C端蛋白酶增強(qiáng)子1(PCPE1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化镥  99.99% metals basisGS(Human Gelsolin) ELISA Kit  人凝溶膠蛋白兔補(bǔ)體因子B(CFB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化釹 99.9% metals basisCRP(Human C-Reactive Protein) ELISA Kit  人C反應(yīng)蛋白兔蛋白酶激活受體2(PAR2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化釹 99%ALD(Human aldosterone) ELISA Kit  人固酮兔球蛋白A Fc段受體(FcαR/CD89)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H446肌肉特異性泛素蛋白連接酶1Elisa試劑盒Cy5標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgGNUPR1/p8  核蛋白p8抗體

活化轉(zhuǎn)錄因子6Elisa試劑盒Cy5.5標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgGNUP88  核孔復(fù)合體蛋白88抗體

前列腺蛋白Elisa試劑盒Cy7標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgGNUP54  NUP54抗體

流感病A IgM抗體Elisa試劑盒PE標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgGNUP50  核孔蛋白50抗體

囊蟲(chóng)病Elisa試劑盒PE-Cy3標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgGNUP37  核孔蛋白Nup37抗體

副流感病1,2,3型IgG抗體Elisa試劑盒PE-CY5標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgGNUP160  核孔蛋白NUP160抗體

副流感病1,2,3型IgM抗體Elisa試劑盒APC標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgGNUMB  膜相關(guān)蛋白Numb抗體

寨卡病IgM抗體Elisa試劑盒Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgGNuMA  核有絲分裂器NuMA蛋白抗體

環(huán)氧二十碳三烯Elisa試劑盒Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgGNUDEL/NDEL1  中心粒蛋白Nudel抗體