實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)條件：RPMI-1640

傳代方法:1：2傳代

公司細胞現(xiàn)貨供應，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
硒粉 ≥99.999% metals basis，-100mesh，powderFlt3(Human FMS-like tyrosine kinase 3) ELISA Kit  人FMS樣酪氨激酶3兔白介素2(IL-2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

硒 ≥99.9999% metals basis,PowderFlt-3L(Human FMS-like tyrosine kinase 3 ligand) ELISA Kit  人FMS樣酪氨激酶3配體兔甘露糖凝集素受體(MBLR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

水質(zhì)硒標樣 濃度范圍:4.95-20.2(mg/L)，分析標準品ACE(Human Angiotensin converting enzyme) ELISA Kit  人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶兔周期素依賴性激酶1(CDK1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

硒 99.999% metals basis，1-6MM particle size AMBP(Human alpha-1-microglobulin/bikunin precursor) ELISA Kit  人α1微球蛋白/bikunin前體兔TU3A蛋白(TU3A)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

硒 ≥99.9999% metals basis,Powder,不規(guī)則顆粒Human podocin ELISA Kit  人Podocin兔半胱氨酰白三烯受體1(CYSLTR1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

四 Standard for GC，>99.9(GC)Human Nephrin ELISA Kit  人蛋白兔促性腺釋放(GnRH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

四 光譜級, ≥99.5%Alpha1-MG(Human Alpha1-microglobulin) ELISA Kit  人α1微球蛋白兔催素(PRL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

四(THF) 無水級,≥99.9%, 無穩(wěn)定劑ALB(Human microalbunminuria) ELISA Kit  人尿微量白蛋白兔補體成分5a(C5a)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

四 AR,99.0%AAA(Human Anti-adrenocortical antibody) ELISA Kit  人抗腎上腺皮質(zhì)抗體兔趨化因子(Lptn/XCL1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

四  ≥99.5% (GC)RANA(Human rheumatoid arthritis associated nuclear artigen) ELISA Kit  人抗類風濕關(guān)節(jié)炎核抗原兔Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

四 for HPLC, ≥99.9%THP(Human T-H glycoprotein) ELISA Kit  人TH糖蛋白兔視黃誘導因/RIG-1樣受體(RLR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

四 ACS，>99.5% (GC) GTE-AGE(Human Glomerular tissue extract-advanced glycosylation end products) ELISA Kit  人腎小球組織糖化終末產(chǎn)物兔卷曲同源物8(FZD8)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

溴乙烷 AR,98%UP(Human Proteinuria) ELISA Kit  人尿蛋白兔胱天蛋白酶12(Casp12)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

N,O-雙(硅烷)三氟 96%LMP7/PSMB99Human low molecular-weight protein/proteasome beta-type subunit) ELISA Kit  人低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白酶體9兔促狀腺抗體(TSA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2-溴噻吩 98%Alpha2-MG(Human Alpha2 macroglobulin) ELISA Kit  人α2巨球蛋白兔血管**素樣蛋白1(ANGPTL1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  
結(jié)腸癌氟尿嘧啶耐藥株鈉轉(zhuǎn)運體抗體Elisa試劑盒PE-CY5標記的小鼠抗豚鼠IgGOLFM3/Optimedin  嗅球蛋白3抗體

鈉轉(zhuǎn)運體Elisa試劑盒APC標記的小鼠抗豚鼠IgGOLFM1  嗅球蛋白1抗體

黃色葡萄球的Cas9核酶Elisa試劑盒Alexa Fluor 350標記的小鼠抗豚鼠IgGOIF  骨誘導因子抗體

黃色葡萄球的Cas9核酶抗體Elisa試劑盒Alexa Fluor 488標記的小鼠抗豚鼠IgGO-GlcNAc transferase  O位N-乙酰葡萄糖OGT抗體

環(huán)形交叉軸突導向受體同源物4Elisa試劑盒Alexa Fluor 555標記的小鼠抗豚鼠IgGOGG1/8 hydroxyguanine DNA glycosylase  8-羥鳥嘌呤DNA糖化酶

天冬酰內(nèi)肽酶Elisa試劑盒Alexa Fluor 647標記的小鼠抗豚鼠IgGOGFOD2  末端多聚腺苷2蛋白抗體

TCF4Elisa試劑盒PE-Cy5.5標記的小鼠抗豚鼠IgGOGFOD1  末端多聚腺苷1蛋白抗體

正絲氨蛋白酶抑制劑E2Elisa試劑盒堿性酶（AP）標記的小鼠抗豚鼠IgGODZ3/Teneurin 3  固生蛋白3抗體

水痘帶狀皰疹病gE抗體Elisa試劑盒FITC標記的小鼠抗豚鼠IgGODF3B  外致密纖維蛋白3B抗體
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。