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形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：貼壁生長

特征特性：此細胞株分離自一個原發(fā)性結(jié)腸癌。當細胞長滿時，表現(xiàn)出典型的腸細胞分化的特征。Caco-2細胞表達維生素A酸結(jié)合蛋白I和視黃醇結(jié)合蛋白II，角蛋白陽性。

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法:1：2傳代
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

L-腎上腺素 98%（劇品）PKB(Human protein kinase B) ELISA Kit  人蛋白激酶B兔重去腎上腺素(NEB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

4-羥-6--2-吡喃酮 99%HO-2(Human heme oxygenase 2) ELISA Kit  人血紅素氧合酶2兔糖化白蛋白(GA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

煙 99%M2-PK (Human Pyruvate Kinase) ELISA Kit  人酮激酶M2型同工酶兔嗜鉻蛋白A/胰抑制素(CgA/Pancreastatin)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

煙 分析標準品TPO(Human Thyroid-Peroxidase) ELISA Kit  人狀腺過氧化物酶兔降鈣素受體(CTR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

重去腎上腺素 ≥98%(HPLC),USPAFU(Human alpha-L-fucosidase) ELISA Kit  人αL巖藻糖苷酶兔β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1 Ab IgM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

煙 用于植物培養(yǎng)，≥99%eNOS(Human Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit  人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶兔硒蛋白1(SEP1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

5-乙-2-吡啶 97%HO-1(Human heme oxygenase 1) ELISA Kit  人血紅素氧合酶1兔肌肉糖原化酶(PYGM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

環(huán)氧烷 Standard for GC，≥99.6% (GC)iNOS(Human inducible nitric oxide synthase) ELISA KIT  人誘導型一氧化氮合成酶兔胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

環(huán)氧烷 ARPL-A2(Human Phospholipidase A2) ELISA Kit  人脂酶A2兔血幼素(HJV/HFE2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

環(huán)氧烷 CPNOS(Human nitric oxide synthase) ELISA Kit  人一氧化氮合成酶兔αL艾杜糖酶(IDUα)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

環(huán)氧烷 ≥99.5% (GC)TE(Human omerase) ELISA Kit  人端粒酶兔Ras-GTP酶激活蛋白1(Ras-GAP1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

環(huán)氧烷 分析標準品MMP-5(Human matrix metalloproteinase 5) ELISA Kit  人質(zhì)金屬蛋白酶5兔干因子(SCF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2,6-二吡啶 98%MMP-4(Human matrix metalloproteinase 4) ELISA Kit  人質(zhì)金屬蛋白酶4兔S100鈣結(jié)合蛋白A11(S100A11)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

3,5-二吡啶 98%MMP-9/Gelatinase B(Human matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B) ELISA Kit  人質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B兔Bcl-2樣蛋白1(BCL2L1/BCL-X)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

乙酰乙酯  99%NSE(Human Neuron-specific enolase) ELISA Kit  人神經(jīng)特異性烯化酶兔甘露糖受體C1(MRC1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
結(jié)腸癌細胞；Caco2腺苷活化蛋白激酶Elisa試劑盒PE-Cy3標記的小鼠抗牛IgGORP4/OSBP2  氧化固結(jié)合蛋白4抗體

果糖激酶2Elisa試劑盒PE-CY5標記的小鼠抗牛IgGORP150  氧氣調(diào)節(jié)蛋白150抗體

N-乙酰氨半糖轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒APC標記的小鼠抗牛IgGOrosomucoid 2  類粘蛋白2抗體

β1,3半糖轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒Alexa Fluor 350標記的小鼠抗牛IgGOrexin-A  增食欲素A/欲A

α2,6-唾液轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒Alexa Fluor 488標記的小鼠抗牛IgGORAV1  口腔癌高表達的蛋白1抗體

白分化抗原27Elisa試劑盒Alexa Fluor 555標記的小鼠抗牛IgGOrai2  跨膜蛋白Orai2抗體

前列腺特異性抗原前體Elisa試劑盒Alexa Fluor 647標記的小鼠抗牛IgGOPN/BSP  骨橋蛋白抗體(型蛋白1)人

甘露糖轉(zhuǎn)移酶2Elisa試劑盒PE-Cy5.5標記的小鼠抗牛IgGOPN/BSP  骨橋蛋白抗體(型蛋白1)

色素P450 4A11Elisa試劑盒羅丹明標記的小鼠抗牛IgGOPGL/RANKL/ODF  骨保護蛋白配體抗體(破骨分化因子)