實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)條件：RPMI-1640

傳代方法:1：2傳代

公司細胞現(xiàn)貨供應，質量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
氧化鎂 AR,98.0%ADAM10(Human A Disintegrin And Metalloprotease 10) ELISA Kit  人解整合素樣金屬蛋白酶10兔球蛋白M(IgM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

氫氧化鎂 AR,95%MMP11(Human matrix metalloproteinase 11) ELISA Kit  人質金屬蛋白酶11兔OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體(OJ/IleRS)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

氫氧化鎂 CP,95%TS(Human thymidylate synthetase) ELISA Kit  人胸苷合成酶兔IV D組脂酶A2(PLA2G4D)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

氫氧化鎂 Ultra pure,≥99.0% (KT)TPHuman thymidinephosphorylase) ELISA Kit  人胸腺嘧啶核苷化酶兔甘露聚糖結合凝集素相關絲氨蛋白酶1(MASP1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

堿式碳鎂 ARPARP(Human Poly ADP ribose polymerase) ELISA Kit  人多聚ADP核糖聚合酶兔粘蛋白17(MUC17)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

海藻鈉 CP，粘度200±20mpa.sGCK(Human glucokinase) ELISA Kit  人葡萄糖激酶兔脾臟酪氨激酶(SYK)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

1-丁烷 98%MAO(Human monoamine oxidase) ELISA Kit  人單氧化酶兔角質轉谷氨酰酶(TGM1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

1-辛烷  99%cPLA2(Human cytosolic phospholipase A2) ELISA Kit  人胞漿型脂酶A2兔補體C5轉化酶(C5c)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

1-辛烷  分析標準品DAO(Human diamine oxidase) ELISA Kit  人二氧化酶兔鞘脂激活蛋白原(PSAP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

二月桂二丁錫 95%COX-2(Human cyclooxygenase-2) ELISA Kit  人環(huán)加氧酶2兔單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

丁錫 Sn 56.5%±0.5%CDK5(Human Cyclin Dependent Kinase 5) ELISA Kit  人周期素依賴性激酶5兔擴張性共濟失調突變因子(ATM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

三丁化錫 96%KLK 10(Human Kallikrein 10) ELISA Kit  人激肽釋放酶10兔軸蛋白抑制蛋白2(AXIN2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

三丁化錫 分析標準品PLC Gamma1(Human Phospholipase C Gamma1) ELISA Kit  人酯酶Cγ鏈兔抗心脂抗體IgA(ACA-IgA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

三正丁氫化錫 96%NA(Human neuraminidase) ELISA Kit  人神經氨酶兔轉錄激活因子-4(ATF-4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

三丁氧化錫 分析標準品PIPLC(Human phosphoinositide-specific phospholipase C) ELISA Kit  人酯酰肌特異性酯酶C兔去唾液糖蛋白受體2(ASGR2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
結腸癌紫衫醇耐藥株ATP合酶亞OElisa試劑盒Alexa Fluor 555標記的小鼠抗人IgGpan methyl Lysine  泛賴氨抗體

糜蛋白酶Elisa試劑盒PE-Cy3標記的小鼠抗人IgGpan 14-3-3  14-3-3蛋白抗體

組蛋白Elisa試劑盒PE-CY5標記的小鼠抗人IgGPALB2  癌易感因相關蛋白2

脫氫酶BElisa試劑盒APC標記的小鼠抗人IgGPAK7/PAK5/MBT  激活激酶PAK7抗體

雷帕霉素靶蛋白C1Elisa試劑盒Cy3標記的小鼠抗人IgGPAK6  P21蛋白激活的蛋白激酶6抗體

二乙酰轉移酶Elisa試劑盒Cy5標記的小鼠抗人IgGPAK4  小鼠抗p21激活激酶4抗體

精脒;精N1-乙酰轉移酶1Elisa試劑盒Cy5.5標記的小鼠抗人IgGPAK4  p21激活激酶4抗體

精脒;精N1-乙酰轉移酶1Elisa試劑盒Cy7標記的小鼠抗人IgGPAK2  p21激活激酶2抗體

乙型腦炎病Elisa試劑盒羅丹明標記的小鼠抗人IgMPAK1  p21激活激酶1抗體
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。