公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門(mén)配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 

U1小核核糖核蛋白A(SNRPA)ELISA試劑盒基氫鈉 5.0 M in 1 M NaOH1,2-二溴烷 99%3-苯酸(>98%,BR)

T特異性鳥(niǎo)苷三磷酸酶(Tgtp)ELISA試劑盒硫酸亞鐵，七水 AR2-溴異丁酸乙酯 98%叔丁基-4-羥基苯甲(>98%,BR)

T受體(TCR)ELISA試劑盒硫酸亞鐵，七水 99.99% metals basis氧氟沙星 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.0% (HPLC)4,4'-聯(lián)吡啶(>98%,BR)

T急性母白血病相關(guān)抗原(TALLA-1/CD231)ELISA試劑盒硫酸鎂，七水 AR,99.0%氧氟沙星 98%4,4-二羥基二苯砜(>98%,BR)

T活化連接蛋白(LAT)ELISA試劑盒硫酸鎂，七水 GR,99.5%氫 CP，99%4,5-二氯熒光素(>98%,BR)

T表面糖蛋白CD1a(CD1A)ELISA試劑盒無(wú)水硫酸鎂 CPL- 99%4-溴異喹啉(>98%,BR)

TU3A蛋白(TU3A)ELISA試劑盒莫能霉素鈉 97%L- ACS, ≥99.5%對(duì)溴苯氧乙酸(>95%,Ind Grade)

Trem樣轉(zhuǎn)錄因子1(TREML1)ELISA試劑盒氯甲酸丁酯 98%L- FCC, ≥99.7%, FG對(duì)基苯甲酸(>98%,BR)

Traf2結(jié)合蛋白(T2BP)ELISA試劑盒氯甲酸芐酯 96%L- 藥用級(jí)對(duì)乙氧基苯甲(>98%,BR)

Toll作用蛋白(TOLLIP)ELISA試劑盒4-異酸酯 98%氯唑靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品4-羥基(>98%,BR)

Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒環(huán)己基異酸酯  98%氯唑靈 95%4-苯甲酸(>98%,BR)

Toll樣受體7(TLR7)ELISA試劑盒綠麥隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品5-氮胞苷 98%對(duì)甲苯(>98.5%,BR)

Toll樣受體6(TLR6)ELISA試劑盒綠麥隆標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=4%2’-脫氧鳥(niǎo)苷 99%對(duì)甲氧基苯乙酮(>98%,BR)

Toll樣受體5(TLR5)ELISA試劑盒綠麥隆標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=6% 5-氟脫氧胞苷 98%4-甲氧基酚(>98%,BR)

Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒3,4-二氯苯異酸酯 97%維生素A棕櫚酸酯 170 USP units /g對(duì)甲基肉桂酸(>98%,BR)

Toll樣受體3(TLR3)ELISA試劑盒2,4-二氯苯氧乙酸 97%DL-α-酚 96%4-甲基傘形酯-N-乙酰-b-D-氨基半乳糖苷(>98%,BR)
大鼠脾源性內(nèi)皮祖細(xì)胞金黃色葡萄球菌

種屬: Staphylococcus│aureus

提供形式: 斜面培養(yǎng)物；凍干物；凍結(jié)物

**等級(jí): 2

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 致病菌檢測(cè)芯片**

培養(yǎng)基: 2

生長(zhǎng)條件: 37℃

西弗冠孢酵母

種屬: Stephanaascus│ciferrii

分離基物: 豬盲腸

提供形式: 斜面培養(yǎng)物

**等級(jí): 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 0436

生長(zhǎng)條件: 25-28℃