實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。 

β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒對壬基酚 分析標準品，異構(gòu)體混合物乙(95%) CP,95.0%對二甲氧基苯(>98%,BR)

β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒對壬基酚 分析標準品,純品乙(95%)  for HPLC1,5-二氨基萘(>98%,BR)

β淀粉樣蛋白(Aβ)ELISA試劑盒正 AR,97%乙(95%) GR,95.0%        1,5-二羥基萘(>97%,BR)

β-促脂素(β-LPH)ELISA試劑盒正 CP,95%乙(95%)  ACS1,6-二羥基萘(>98%,BR)

β半乳糖苷酶(β-GAL)ELISA試劑盒正 Standard for GC，>99%(GC)95%藥用酒精 藥用級1,8-辛二(>98%,BR)

β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒乙酸正酯 AR,99.0% 95%乙 光譜純1-萘乙酮(>95%，BR)

β氨基己糖苷酶A(β-Hex A)ELISA試劑盒甲醋酸酯 99%高哌 98%1-溴金剛烷(>99%,BR)

β4整合素(ITG β4/CD104)ELISA試劑盒乙二  99.4%2-基吡啶 98%烯基硫脲(>98%,BR)

β2轉(zhuǎn)鐵蛋白(β2TF)ELISA試劑盒正 CP,98.5% 乙基黃原酸 AR，95%1-溴3-氯烷(>97%,BR)

β2整合素(ITG β2/CD11+CD18)ELISA試劑盒聚乙烯吡咯烷酮 平均分子量 8000, K16-18乙基黃原酸 98%溴代庚烷(>98%,BR)

β2微球蛋白(β2-MG)ELISA試劑盒三氯乙烯 CP,98.5%2-氨基嘧啶 98%1-溴代萘(>98%,BR)

β2微球蛋白(MGβ2)ELISA試劑盒1,2,3,4-四氫萘 CP2-(3-氯苯氧基)酸 98%溴辛烷(>98%,BR)

β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒1,2,3,4-四氫萘 AR，97%1-甲酰 99%1-甲基咪唑(>98%,BR)

β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1 Ab IgM)ELISA試劑盒1,2,3,4-四氫萘 Standard for GC, ≥99.5% (GC)3-吡啶甲 98%1-乙基咪唑(>98%,BR)

β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1 Ab IgG)ELISA試劑盒1,2,3,4-四氫萘  >98.5%(GC)反-玉米素 98%1-萘乙(>98%,BR)

β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA試劑盒1,2,3,4-四氫萘 分析標準品，≥99.5% (GC)偏釩酸銨 CP，98%乙酸-1-萘酯(>98%,BR)
大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細胞熱帶假絲酵母

種屬: Candida│tropicalis

提供形式: 斜面培養(yǎng)物

**等級: 1

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 飼料

培養(yǎng)基: 13

生長條件: 28℃

海氏腸球菌

種屬: Enterococcus│hirae

提供形式: 凍干物

**等級: 1

模式菌株: yes

應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株

培養(yǎng)基: 0214

生長條件: 37℃
培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。