公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA試劑盒乙二叔丁  99%氟化，二水 CP軟海綿酸(>95.0%,BC)

β-微精原蛋白(MSMB/PRSP)ELISA試劑盒乙二單己 98%氟化，二水 AR軟海綿酸鈉(>95.0%,BC)

β-微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒烯酸異辛酯 >99.0%(GC)氟化，無水 GR，粉末鄰苯二甲酸酐(>98%.BC)

β乳球蛋白(β-Lg)ELISA試劑盒乙二丁 CP，98.5%鈉 GR，99.5%結(jié)晶碳酸(>98%,BR)

β羥丁酸(β-OHB)ELISA試劑盒烯酸羥酯 97%氟化鈉 99.99% metals basis焦磷酸(>97%,BC)

β葡萄糖酸苷酶(βGD)ELISA試劑盒甲基烯酸羥乙酯 98%氟化鈉 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99.93%鎢酸二水(>98%,BR)

β葡萄糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒甲基烯酸羥乙酯 96%氟化鈉 SP對甲苯磺酰氯(>98%,BR)

β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒硫酸羥 CP,97.0%氟化鈉 PT硫酸奎寧水合物(>98%,BR)

β內(nèi)酰酶抑制劑(BLI)ELISA試劑盒烯酸羥乙酯 97%(含200-300ppmMEHQ穩(wěn)定劑)氟化鈉 ACS, ≥99%鈉(> 98%,BC)

β內(nèi)酰酶(β-lactamase)ELISA試劑盒正己烷 AR，97%氟化鈉 AR，98%次氯酸鈉溶液

β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒甲基烯酸羥酯  97%氟化鈉 昆蟲培養(yǎng)級, ≥99%磷酸氫二鈉十二水(>98%,BR)

β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒異辛烷 AR,97%縮節(jié) 分析標(biāo)準(zhǔn)品磷鎢酸鈉(>98%,BC)

β萘酚(β-Nph)ELISA試劑盒異辛烷 for HPLC, >97% (GC)縮節(jié) 98%硬脂酸鈉(>95%,BR)

β萘酚(β-naphthol)ELISA試劑盒異 Standard for GC,>99%(GC)阿斯巴甜 98%硫代硫酸鈉無水(>98.5%,BC)

β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒異 >98.0% (GC)(含100ppm BHT穩(wěn)定劑)1,2,3,4-丁烷四羧酸 99%Sulfo NHS LC Biotin

β-連環(huán)蛋白(CTNNB1/CTNNB/OK/SW-cl.35/PRO2286)ELISA試劑盒異 CPDL-蘋果酸 CP，99%Sulfo NHS SS Biotin
大鼠卵巢顆粒細(xì)胞香菇

種屬: Lentinula│edodes

提供形式: 斜面培養(yǎng)物

**等級: 1

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 食用、藥用，中國野生種

培養(yǎng)基: 0014

生長條件: 25℃

產(chǎn)氣腸桿菌

種屬: Enterobacteraerogenes

分離基物: 痰液

**等級: 1

模式菌株: yes

應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株。水質(zhì)檢測，質(zhì)量控制菌株。

培養(yǎng)基: 2

生長條件: 37℃