實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。 

酮(MGO)ELISA試劑盒碳酸銀 AR,99.0%1,3-二氯烷 分析標準品, ≥99.5% (GC)堿式碳酸鎂五水(>98%,BC)

二酸單酰輔酶A(malonyl CoA)ELISA試劑盒氯金酸鈉 金含量,48% 2-氨基-6-氯吡啶 97%二氧化錳(>97.5%,BC)

二(MDA)ELISA試劑盒磷酸銀 銀含量, 77.0 % 2-氨基-4-氯吡啶 97%1,3－二苯基脲(>98%,BR)

氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)ELISA試劑盒二氯四氨鈀 Pd ≥43.0%2-氨基-6-甲氧基吡啶 97%聚乙二600

別孕烯酮/3α,5α-四氫孕酮(AP/3α,5α-THP)ELISA試劑盒四氨合氯化鉑 水合物 98%2-溴-6-氨基吡啶  98%普魯士蘭(>98%,BS)

表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒四（三苯基膦）鈀(0) 99.8% metals basis, Pd 9.0%5-溴噻吩-2-磺酰氯 97%派洛寧B(Ind)

表皮活化肽因子(CAPF)ELISA試劑盒三苯基膦氯化銠 RH 11.1%5-溴噻吩-2-磺酰  97%5-溴-4-氯-3-吲哚基-N-乙酰-beta-D-氨基半乳糖苷

表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白7(EGFL7)ELISA試劑盒蟲草素  分析標準品，99%（HPLC）叔丁基異酸酯 97%巖藻黃質(zhì)；褐藻素

表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒總銀杏酸(C13:0,C15:1,C17:2,C15:0,C17:1) ≥90%3-溴-2-基吡啶 98%乙酸鋇(>99%,BR)

表皮角蛋白(EK)ELISA試劑盒6-氯-1-己 95%3-氯基異酸酯  96%苯甲酸酐(>99%,BR)

表面膜球蛋白M(mIgM)ELISA試劑盒辛二 99%鄰氯苯異酸酯 98%Brij 58

表面膜球蛋白D(mIgD)ELISA試劑盒辛二酸 99%間氯苯異酸酯 98%硫酸鈷七水(>99%,BR)

表面膜球蛋白A(mIgA)ELISA試劑盒N-氨酰甲基乙磺酸 99%環(huán)己基異酸酯  98%二硫代乙酰(>98%,BR)

表面活性蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒4-氨基-3-肼基-5-巰基-1,2,5-三唑(用于的測定) 99%4-氯-2-吡啶甲酸 98%脫氧核糖核酸酶 II

表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒瓊脂糖 for biochemistry 4-氯吡啶-2-甲酸甲酯 98%高粘度羥乙基纖維素

表達于SiSo系的受體結(jié)合型腫瘤抗原(RCAS1)ELISA試劑盒3-氨基-9-乙基咔唑  95%5-氯噻吩-2-磺酰 97%L-天冬氨酸鈉一水
大鼠股動脈平滑肌細胞嗜熱鏈球菌

種屬: Streptococcus│thermophilus

分離基物: 酸奶

提供形式: 斜面培養(yǎng)物；凍干物

**等級: 1

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 乳品發(fā)酵

培養(yǎng)基: 6

傷寒沙門氏菌

種屬: Salmonella│typhi

提供形式: 凍干物

**等級: 2

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 噬菌體分型用 Vi 42　　　9,12,Vi　d　-

培養(yǎng)基: CM0051

生長條件: 37℃
培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。