公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實(shí)驗效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗原理等相關(guān)操作說明。

實(shí)驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。 

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

補(bǔ)體因子B前體(pre-CFB)ELISA試劑盒二氧化銥 Ir 86%富馬酸二甲酯 99%檸檬酸二銨,檸檬酸氫二銨

補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白(CCP)ELISA試劑盒銥粉 99.99% metals basis己二酸二乙酯 CP,99.0%乳酸鈣五水(>98%,USP)

補(bǔ)體片斷5b(C5b)ELISA試劑盒銥粉 99.9% metals basis己二酸二乙酯 AR,99.5%2'-脫氧胸苷-5'-一磷酸二鈉鹽

補(bǔ)體片斷5a(C5a)ELISA試劑盒三氯化銥  試劑級,Ir>52%磷酸三辛酯 98%衛(wèi)茅(>99%，分子生物學(xué)級)

補(bǔ)體片斷4b(C4b)ELISA試劑盒四氯化銥(IV) 水合物 Ir 48.0 - 55.0 %磷酸三辛酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品2-氯乙基膦酸(>90%,植物級)

補(bǔ)體片斷3b(C3b)ELISA試劑盒氯亞鉑酸 AR磷酸三辛酯 99%硝酸鐵九水

補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒醋酸鈀 AR，Pd 46.0 - 48.0 %腺嘌呤鹽酸鹽 98.5% (HPLC)松三糖

補(bǔ)體片段4d(C4d)ELISA試劑盒氧化鈀 Pd ≥85% 腺嘌呤 98%聚乙二20000

補(bǔ)體片段3d(C3d)ELISA試劑盒二溴化鈀 Pd 40 % 腺嘌呤磷酸鹽 99%對甲苯磺酸鈉

補(bǔ)體片段3c(C3c)ELISA試劑盒氯鈀酸 Pd 26.2%6-芐氨基嘌呤 99%高酸鈉一水(>97%,BR)

補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA試劑盒氯化鈀  Pd 59-60%4-氯-2,5-二甲氧基苯  98%SPDP；N-琥珀酰亞-3-(2-吡啶二硫代)酸酯

補(bǔ)體蛋白9(C9)ELISA試劑盒氯鉑酸 98%1,4-二甲氧基苯 99%2-氨基噻唑(>98%，BR)

補(bǔ)體蛋白5(C5)ELISA試劑盒硝酸鈀 Pd 18.09 wt. % in nitric acid2,5-二乙氧基苯  97%氯化鈰七水

補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試劑盒硝酸鈀(II) 水合物 Pd ≥39.0%2,5-二甲氧基苯 97%D-阿拉伯糖(標(biāo)準(zhǔn)品)

補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒氫氧化鈀 AR,99.99%2,4,5-三氯苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%D-阿拉伯糖

補(bǔ)體C5a(C5a)ELISA試劑盒氫氧化鈀 20% Pd2,4,5-三氯苯 97%三氯六氨絡(luò)鈷;六氨基氯化鈷
大鼠鞏膜上皮細(xì)胞變色多孔菌

種屬: Polyporus│versicolor

提供形式: 斜面培養(yǎng)物

**等級: 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 0091

生長條件: 28℃

存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法

Georgeniamuralis

種屬: Georgeniamuralis

分離基物: 中世紀(jì)的壁畫，奧地利

**等級: 1

模式菌株: yes

應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株

培養(yǎng)基: 108

生長條件: 28℃