公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)ELISA試劑盒超細(xì)鉑粉 99.9%,平均粒度:0.1-0.5μm甘露  超純級，≥99.0%(HPLC)十二烷基苯磺酸鈉(>95%,Tech Grade)

促腎上皮質(zhì)釋放(CRH)ELISA試劑盒鉑標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml麥芽糖 95%硅酸鈉九水(>98%，BR)

促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒銀 99.9%，≤0.1μm甘露 植物培養(yǎng)級,≥99.0%（GC)多聚磷酸鈉(>98%，BR)

促甲狀腺素受體抗體(TRAb)ELISA試劑盒銀 99.95%，1.0μm果膠 半乳糖酸(干基計)≥74.0 %鹽酸三(>98%，BR)

促甲狀腺素受體(TSHR)ELISA試劑盒銀 99.9%,≤0.5μmD-山梨 AR,98.0%5-溴-3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷(>98%,BR)

促甲狀腺素釋放(TRH)ELISA試劑盒水質(zhì)銀標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品D-山梨 分析標(biāo)準(zhǔn)品, >99.5% (HPLC)磷酸氫二鈉二水

促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒銀 99.5%，60-120nmD-山梨 用于分子生物學(xué), ≥98%中性蛋白酶

促黃體(LH)ELISA試劑盒銀粉 99.99% metals basis，≤0.1μmD-山梨 用于培養(yǎng)，≥98%聚乙二200

促紅**素(EPO)ELISA試劑盒異辛 99%D-山梨  超純級，≥99.5% (HPLC)銻(> 98%,BR)

促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)ELISA試劑盒庚 98%D-山梨 用于細(xì)植物胞培養(yǎng)，≥98%結(jié)晶碳酸鈉(>99%,BR)

雌一(E1)ELISA試劑盒異丁 99%DL-α-酚 96%中性氧化鋁(BR)

雌酮(estrone,E1)ELISA試劑盒辛 99%4,6-三(3,5-二叔丁基-4-羥基芐基)苯 99%D-(>99%，BC)

雌三(E3)ELISA試劑盒三辛 90%(+)-δ-酚 90%吲哚(>98%,BR)

雌受體β(ESR2)ELISA試劑盒三辛 離子對試劑酚乙酸酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品硫酸鋰(>98%,BR)

雌受體(ER)ELISA試劑盒三辛 98%酚乙酸酯 ≥96% (HPLC)硫柳汞鈉鹽

雌硫酸轉(zhuǎn)移酶(SULT1E1)ELISA試劑盒三異辛 98%木糖 99%硅粉(>99%，BR)
大鼠肺微血管周細(xì)胞丁香假單胞菌

種屬: Pseudomonas│syringae

分離基物: 天牛腸道

提供形式: 凍干物

**等級: 1

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 飼料用纖維素酶、植酸酶、木聚糖酶等的篩選

培養(yǎng)基: 0002

藤黃色土生單胞菌

種屬: Terrimonas│lutea

提供形式: 凍干物

**等級: 1

模式菌株: yes

培養(yǎng)基: CM0002

生長條件: 28℃

存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法