實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。 

高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒刀豆凝集素A 2 μg/ml1,2,4-三氯苯 光譜純瓊脂粉

高糖基化絨毛膜促性腺(hCG)ELISA試劑盒 USP級(jí)氫氧化鈉 GR,97%,片狀三氟胸苷;三氟尿苷(TFT)

高速泳動(dòng)蛋白17(HMG-17)ELISA試劑盒3-[(3-膽固氨基)二甲基氨基]-2-羥基-1-磺酸 99%6-氨基熒光素  >97%(HPLC)四水合輔羧酶;四水合硫焦磷酸酯

高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒橘霉素 98%5(6)-氨基熒光素  熒光級(jí),>94%(HPLC)甲磺酸加替沙星

高遷移率族蛋白1(HMGB1)ELISA試劑盒硫酸葡聚糖 M.W 5000005-氨基熒光素 96%鹽酸哌羅匹隆

高敏狀腺原氨酸(u-T3)ELISA試劑盒葡聚糖10 分子量100006-羧基熒光素 95%替拉扎明

高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒毛地黃皂苷 50%5-羧基熒光素 95%糊精;白糊精

高密度脂蛋白膽固(HDL-C)ELISA試劑盒4,’6-二脒基-2-苯基吲哚 98%5-羧基四甲基羅丹明 95%鹽酸芐達(dá)明

高密度脂蛋白3(HDL3)ELISA試劑盒十二烷基吡喃葡萄糖苷 99%5(6)-羧基熒光素二乙酸酯 for fluorescence, ≥90.0% (HPLC)葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(中顆粒)

高密度脂蛋白2(HDL2)ELISA試劑盒硫酸葡聚糖鈉鹽 分子量500000，無DNA酶/RND酶/蛋白酶6-羧基熒光素二乙酸酯  95%葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(粗顆粒)

高密度脂蛋白1(HDL1)ELISA試劑盒三磷酸脫氧鳥苷鈉鹽 98%5-羧基熒光素琥珀酰亞酯 90%L-(+)-扁桃酸;S-扁桃酸

高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒三磷酸脫氧鳥苷溶液 dGTP,100 mM 溶液, pH 7.05(6)-羧基熒光素 95%D-(-)-扁桃酸;R-扁桃酸

高靈敏度促甲狀腺(U-TSH)ELISA試劑盒N-癸酰基-N-甲基葡糖 生化試劑級(jí)，BC5(6)-羧基熒光素琥珀酰亞酯 96%1-氨基海因鹽酸鹽;AHD，1-氨基乙內(nèi)酰脲鹽酸鹽

高分子量脂聯(lián)素(HMW Adiponectin)ELISA試劑盒N-癸酰基-N-甲基葡糖 高純級(jí)6-羧基熒光素琥珀酰亞酯 90%1-氨基海因鹽酸鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）

高分子量角蛋白(CK-HMW)ELISA試劑盒糖原 ≥90% 5- 羧基熒光素二乙酸酯 95%人促腎上腺皮質(zhì)(1-24),替可克肽

高爾基體抗體(AGAA)ELISA試劑盒乙酰 98%異硫酸熒光素(異構(gòu)體I) 90%緩激肽
sh-sy5y轉(zhuǎn)染野生型細(xì)胞微黃棒桿菌

種屬: Corynebacterium│flavescens

提供形式: 凍干物

**等級(jí): 1

模式菌株: yes

應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株

培養(yǎng)基: 0002

生長(zhǎng)條件: 30℃

共頭霉

種屬: Syncephalastrum│sp.

分離基物: 土壤

提供形式: 凍干物

**等級(jí): 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 0014

生長(zhǎng)條件: 25℃
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。