
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在**上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
公司專業(yè)供應的抗體,產(chǎn)品僅用于科研是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。
產(chǎn)品名稱 |
脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體100ul |
英文名稱 |
Anti-ATXN1/Ataxin-1 |
貨號 |
K210016 |
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
抗體的制備過程:
1. 原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量**時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)并添加防腐劑。
抗體的多樣性:
抗體的異質(zhì)性??贵w的組成極為復雜,是由成千上萬、多種多樣的球蛋白(Ig)分子所組成。這些Ig分子在形狀、大小、結(jié)構(gòu)以及氨基酸的組成和排列上,既相似,又有差別。由于有差別,它們的電泳活性就有很大的變化。
因為抗體具有與抗原決定簇相對應的結(jié)合部位(抗原結(jié)合簇),所以抗體與抗原的結(jié)合具有特異性。另一方面,抗體本身是一種蛋白質(zhì),具有本身的氨基酸組成、排列和立體結(jié)構(gòu),對異種動物來說,它又是抗原。各類Ig都具有可用血清學方法檢出的抗原特異性,它們表現(xiàn)出不同的血清學類型。
一抗和二抗的區(qū)別:
抗體就是平常所說的抗體,即能和抗原特異性結(jié)合。
抗體是能和抗體結(jié)合的,即抗體的抗體。主要用于檢測抗體的存在。
一抗是針對抗原的抗體,二抗是針對一抗的抗體。即抗體也可以充當抗原刺激機體產(chǎn)生抗體。也就是說,抗原進入機體刺激機體系統(tǒng)產(chǎn)生應答,由B細胞可以產(chǎn)生與相應抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特殊蛋白質(zhì)。
一抗二抗都是一種可以特異結(jié)合別的物質(zhì)的基團,而且一抗可以至少結(jié)合兩種其他基團(底物和二抗)。
一抗:可以特異結(jié)合底物,就是識別出我們想要檢測的東西。一抗和底物結(jié)合與否用肉眼是看不出來的。
二抗:可以和一抗結(jié)合,并帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發(fā)光或顯色基團),作用是檢測一抗。 如果一抗自己帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發(fā)光或顯色基團),則不需要二抗。但這樣成本很高,因為一種一抗只識別一種底物。所以如今的設計一般是二抗帶上可檢測標記,再來檢測一抗。而一抗識別底物。這樣,當一抗結(jié)合到底物上,就可以通過二抗檢測出來。
酰基鞘氨醇脫酰酶2抗體英文全稱Trace Amine Associated Receptor 6英文簡稱TAAR6檢測范圍308nmol/L-48ng/mL
脂肪細胞特異性粘附分子抗體英文全稱skeletal muscle Actinin-α英文簡稱sm Actinin-α檢測范圍309nmol/L-2400pg/mL
腺相關(guān)病毒5抗體英文全稱Erythrocyte transketolase英文簡稱ETK檢測范圍310nmol/L-800mU/L
AFP4a蛋白抗體英文全稱RSV Antigen英文簡稱RSV Antigen檢測范圍311nmol/L-80IU/L
Rho GTP酶激活蛋白32抗體英文全稱Ring Finger Protein 18英文簡稱RNF180檢測范圍312nmol/L-48μg/mL
細胞衰老相關(guān)蛋白ASF1A抗體英文全稱Ring Finger Protein 213英文簡稱RNF213檢測范圍313nmol/L-48ng/mL
脂肪甘油三酯脂酶抗體英文全稱activated coagulation factor XIII英文簡稱FXIIIb檢測范圍314nmol/L-1600pg/mL
雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸細胞源性生長因子)抗體英文全稱Activity Dependent Neuroprotector Protein英文簡稱ADNP檢測范圍315nmol/L-8ng/mL
能量平衡相關(guān)蛋白抗體英文全稱Tenascin-R英文簡稱TN-R檢測范圍316nmol/L-40ng/mL
禽腦脊髓炎病毒AEV抗體英文全稱antibody against muscle-specific tyrosine kinase英文簡稱MuSK Ab檢測范圍317nmol/L-320pg/mL
唾液酸糖蛋白受體1抗體英文全稱Dystrophin英文簡稱DMD檢測范圍318nmol/L-8ng/mL
氨基糖苷類磷酸結(jié)構(gòu)域蛋白抗體英文全稱Dystrophin Associated Glycoprotein 1英文簡稱DAG1檢測范圍319nmol/L-16ng/mL
A激酶錨定蛋白5抗體英文全稱utrophin英文簡稱utrophin檢測范圍320nmol/L-2000pg/mL
芳香基硫酸酯酶F抗體英文全稱matrilysin英文簡稱MAT檢測范圍321nmol/L-8ng/mL
小腦脊髓共濟失調(diào)蛋白3抗體英文全稱Stromelysin-2英文簡稱ST2檢測范圍322nmol/L-1600pg/mL
腺苷酸活化蛋白激酶γ3抗體英文全稱Kallikrein 10英文簡稱KLK10檢測范圍323nmol/L-8ng/mL
脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體100ul琥珀膽標準品 英文名稱:Succinylcholine Chloride
琥珀/丁二標準品 英文名稱:Succinic Acid
甜菊糖標準品 英文名稱:Stevioside
硬脂醇標準品 英文名稱:Stearyl Alcohol
硬脂酰聚氧甘油酯標準品 英文名稱:Stearoyl Polyoxyglycerides
硬脂標準品 英文名稱:Stearic Acid
司他夫定標準品 英文名稱:Stavudine
康力龍標準品 英文名稱:Stanozolol CIII -
角鯊標準品 英文名稱:Squalane -
螺內(nèi)酯標準品 英文名稱:Spironolactone
鹽大觀霉素標準品 英文名稱:Spectinomycin Hydrochloride
鹽索他洛爾標準品 英文名稱:Sotalol Hydrochloride -
山梨醇標準品 英文名稱:Sorbitol
山梨標準品 英文名稱:Sorbic Acid
人生長標準品 英文名稱:Somatropin -