細(xì)胞系進(jìn)行鑒定分享
所謂細(xì)胞系鑒定即通過 STR(短串聯(lián)重復(fù))圖譜所建立細(xì)胞系的遺傳特征。一株細(xì)胞系的遺傳特征確立后,細(xì)胞系可以通過定期的檢測,以防止出現(xiàn)細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染的情況。
首先進(jìn)行細(xì)胞系STR鑒定是很重要的。很多生物醫(yī)藥的研究都采用培養(yǎng)細(xì)胞來進(jìn)行,這些細(xì)胞可能是受贈(zèng)于其它研究人員,也可能是從細(xì)胞庫(如美國?ATCC,American?Type?Culture?Collection)得來。據(jù)估計(jì),15-20%的實(shí)驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)中所使用的細(xì)胞已經(jīng)不是原來的細(xì)胞系,或者與其它細(xì)胞系發(fā)生了交叉污染。顯然,細(xì)胞系遭到污染、特征鑒別錯(cuò)誤,將會(huì)大大的威脅著基于這些細(xì)胞而發(fā)表的論文質(zhì)量和研究發(fā)現(xiàn)的正確性。為此,很多細(xì)胞庫現(xiàn)在都要對提交來的細(xì)胞系進(jìn)行鑒定,并對細(xì)胞系之間的交叉污染進(jìn)行監(jiān)測。
現(xiàn)在很多機(jī)構(gòu)都已經(jīng)認(rèn)識到這個(gè)的重要性,ATCC和FDA,這些機(jī)構(gòu)要求對用于制藥領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)中所使用的材料?—?諸如細(xì)胞系?—?應(yīng)該進(jìn)行“身份鑒定”和純度測試。很多雜志也要求使用細(xì)胞系的文章提供STR指紋圖譜數(shù)據(jù)。
FDA建議研究人員在培養(yǎng)細(xì)胞的較早階段(細(xì)胞培養(yǎng)第1周)來鑒定細(xì)胞系的身份。細(xì)胞在被凍存前應(yīng)再一次進(jìn)行鑒定;對于活躍生長的細(xì)胞,每兩個(gè)月應(yīng)鑒定一次;文獻(xiàn)發(fā)表前也應(yīng)對細(xì)胞系身份進(jìn)行鑒定。
如果一個(gè)實(shí)驗(yàn)室使用不止一種細(xì)胞系,則應(yīng)在實(shí)驗(yàn) zui 開始時(shí),就要對所有的細(xì)胞系進(jìn)行鑒定,以便排除交叉污染。
這樣將減少由于細(xì)胞系發(fā)生交叉污染或身份誤認(rèn),將導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的無效或數(shù)據(jù)誤導(dǎo)。