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生化試劑，標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)照品，PCR試劑盒，?核酸檢測(cè)試劑盒，熒光定量檢測(cè)試劑盒，生化試劑盒?，比色法試劑盒，酶活性檢測(cè)試劑盒，ELISA試劑盒，酶聯(lián)免yi檢測(cè)試劑盒，試劑盒，ELISA試劑盒，抗體，重組蛋白，分光光度法檢測(cè)試劑盒，細(xì)胞株，原代細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)基，標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
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qPCR?試驗(yàn)無(wú)Ct值出現(xiàn)原因及解決方法
日期：2025-01-08 18:24
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摘要：
qPCR試驗(yàn)無(wú)Ct值出現(xiàn)原因及解決方法：
1、檢測(cè)熒光信號(hào)的步驟有誤：
一般染料法采用72℃延伸時(shí)采集，探針?lè)▌t一般在退火結(jié)束時(shí)或延伸結(jié)束采集信號(hào)。
2、引物或探針降解：
可通過(guò)PAGE電泳檢測(cè)其完整性。
3、模板量不足：
對(duì)未知濃度的樣品應(yīng)從系列稀釋樣本的zui高濃度做起。
4、模板降解：
避免樣品制備中雜質(zhì)的引入及反復(fù)凍融的情況。
5、反應(yīng)循環(huán)數(shù)不夠：
一般都要在35個(gè)循環(huán)以上，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)情況增加循環(huán)，但高于45個(gè)循環(huán)會(huì)增加過(guò)多的背景信號(hào)。
qPCR試驗(yàn)無(wú)Ct值出現(xiàn)原因及解決方法：
一般染料法采用72℃延伸時(shí)采集，探針?lè)▌t一般在退火結(jié)束時(shí)或延伸結(jié)束采集信號(hào)。
2、引物或探針降解：
可通過(guò)PAGE電泳檢測(cè)其完整性。
3、模板量不足：
對(duì)未知濃度的樣品應(yīng)從系列稀釋樣本的zui高濃度做起。
4、模板降解：
避免樣品制備中雜質(zhì)的引入及反復(fù)凍融的情況。
5、反應(yīng)循環(huán)數(shù)不夠：
一般都要在35個(gè)循環(huán)以上，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)情況增加循環(huán)，但高于45個(gè)循環(huán)會(huì)增加過(guò)多的背景信號(hào)。