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簡述ELISA實驗的原理和常用檢測方法
日期：2025-01-08 18:46
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摘要：簡述ELISA實驗的原理和常用檢測方法
ELISA 實驗是科研人員經(jīng)常用到的實驗方法。很多人覺得ELISA很簡單，其實不然。現(xiàn)了解下ELISA實驗的原理和常見辦法。
實驗原理:
1.包被：抗原/抗體，固相化
2.反響： 1)待測抗體/抗原； 2)酶標(biāo)抗原/抗體
3.洗滌：使結(jié)合在固相上的抗原抗體復(fù)合物與未結(jié)合的別離
4.底物顯色：定性/定量剖析
常用檢測方法:
1.間接法
檢測抗體常用的辦法, 首要用于對病原體抗體的檢測。
優(yōu)勢：二抗能夠加強(qiáng)信號，并且有多種挑選能做不同的測定剖析。不加酶符號的上等抗體則能保留它多的免yi反響性。
缺陷：交互反響發(fā)生的機(jī)率較高
2.雙抗體夾心法
檢測大分子抗原常用的辦法。
優(yōu)勢：高活絡(luò)、高專一性，抗原無須事前純化。
缺陷：抗原必定得具有兩個以上的抗體結(jié)合部位。
3.競爭法
檢測小分子半抗原（藥su、激su等）。
優(yōu)勢：可適用比較不純的樣本，并且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。
缺陷：全體的敏感性和專一性都較差。