商品屬性：
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貨號(hào) |
規(guī)格 |
產(chǎn)品名稱 |
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A-Hc2226-20 μl |
20 μl |
pET-22b(+) Seamless Cloning Kit（線性化質(zhì)粒） |
儲(chǔ)存條件：
pET-22b(+) Seamless Cloning Kit（線性化質(zhì)粒）保存條件：-20℃保存
產(chǎn)品介紹：
pET-22b(+)載體為高水平的原核表達(dá)載體，在N端含有PelB信號(hào)肽序列，能夠?qū)⒈磉_(dá)的目的蛋白定位在細(xì)胞外周質(zhì)腔，同時(shí)在C端具有His標(biāo)簽。本產(chǎn)品提供pET-22b(+)經(jīng)EcoRⅠ酶切后的線性化載體，可用無縫克隆技術(shù)將單個(gè)或多個(gè)DNA片段組裝到載體上。
無縫克隆技術(shù)可在重組酶的作用下，只需一步反應(yīng)，便可將片段克隆到任何載體中的任意位置，得到重組質(zhì)粒。無縫克隆技術(shù)作為一種非常強(qiáng)大的克隆技術(shù)，具有快速、 簡便、高效、多片段組裝和定向克隆等特點(diǎn)，用于單個(gè) DNA 片段的克隆，多個(gè) DNA 片段組裝克隆以及多位點(diǎn)突變構(gòu)建等實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?
產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. pET-22b(+)載體為原核表達(dá)載體，具有N-PelB signal seqence和C-His標(biāo)簽。
2. pET-22b(+)經(jīng)EcoRⅠ酶切后的線性化載體，省時(shí)省力。
3. 無縫克隆技術(shù)只需要簡單的 PCR 擴(kuò)增就可以制備片段DNA。
4. 可以克隆長片段和多片段DNA。
5. 簡單、快速、定向克隆。
操作步驟：
1. pET-22b(+)線性化載體使用方法：
(1) pET-22b(+)線性化載體當(dāng)做克隆載體使用，可以在擴(kuò)增PCR產(chǎn)物的
上游引物 5’端添加序列：CGCTGCCCAGCCGGCGATGGCCATG
下游引物 5’端添加序列：CTCAGTGGTGGTGGTGGTGGTGCTCGAG
通過無縫克隆連接到pET-22b(+)中。
(2) 測序引物
T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'
T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'
(3) pET-22b(+)線性化載體為 EcoRⅠ酶切后的線性化載體，圖譜及多克隆位點(diǎn)
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